產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
大鼠卵巢上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0891 |
商品介紹:
名稱 大鼠卵巢上皮細(xì)胞 2.組織來(lái)源:卵巢組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 大鼠卵巢上皮細(xì)胞分離自卵巢組織,;卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官,,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素,。卵巢的位置與睪丸相同,,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),,呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,,卵泡呈黃色,,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān),。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢,,但是部分魚類的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能,。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官,,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織,。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì),。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成,;髓質(zhì)位于中央,,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管,、淋巴管和神經(jīng),。卵巢上皮細(xì)胞主要功能:①上皮細(xì)胞能分泌激素,刺激卵細(xì)胞分化成熟,;②細(xì)胞能分泌炎癥介質(zhì),,參與炎癥反應(yīng)。 5.方法簡(jiǎn)介: 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵巢上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè): 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵巢上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R053 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%,;CO2,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),, 以防止冰晶過(guò)大,,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些,。
![88.jpg 88.jpg](https://img78.chem17.com/6fd5d5abffebbb9eb8c0dca9a38143fb82e0e616002c0b08ef4b21ae4f928fa17a26fb8bf5fa78d9.jpg)
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,懸浮細(xì)胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 CLEC4G 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CLEC1A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CLEC1B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 AMN 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CLCF1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 ANGPTL2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 ANGPT1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 Angiopoietin-like7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 ANGPT2 / ANG2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 ALK-2 / ACVR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠卵巢上皮細(xì)胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human ADP/ATP translocase 1
0.312-20 ng/mL 人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人二肽基肽Ⅳ(DPP-Ⅳ)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human S-adenosylmethionine synthase isoform type-2
SIM生化管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支/盒
15.6-1000 pg/mL 人富糖蛋白(HPRG/HRG)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Stanniocalcin-2
乙基紫疊氮鈉肉湯 英文名稱:Ethyl Violet Aziode Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g
3.12-200 U/L ELISA Kit for Human L-lactate dehydrogenase A chain
營(yíng)養(yǎng)肉汁 英文名稱:Nutrient Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g