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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠肌腱干細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1185 |
商品介紹：
名稱 大鼠肌腱干細(xì)胞 2.組織來源：肌腱組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠肌腱干細(xì)胞分離自肌腱組織,；肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織,，便于肌肉附著和固定,。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上，是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運(yùn)動。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分，肌腹由肌纖維構(gòu)成,，色紅質(zhì)軟，有收縮能力,，肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成,，色乳白較硬，沒有收縮能力,。肌腱把骨骼肌附著于骨骼,。長肌的肌腱多呈圓索狀，闊肌的肌腱闊而薄,，呈膜狀,，又叫腱膜,。此處的肌腹即為通常所說的紅肌，而肌腱即為白肌,，分別控制肌肉的力量、爆發(fā)力和耐力,。肌腱干細(xì)胞（TSCs）是一種來源于肌腱組織的間充質(zhì)干細(xì)胞,，其具有多向分化潛能，并且在外源性前列腺素E2作用下異常分化,。體外培養(yǎng)時(shí)該細(xì)胞群具有克隆形成能力,、自我更新及多向分化潛能等干細(xì)胞的普遍特性。肌腱干細(xì)胞可以被誘導(dǎo)向脂肪細(xì)胞,、軟骨樣細(xì)胞,、骨細(xì)胞分化；在裸鼠模型中,，肌腱干細(xì)胞還可以形成肌腱樣組織,，軟骨樣組織以及腱-骨連接樣組織等。相比骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞而言,，TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力,，軟骨相關(guān)基因和肌腱相關(guān)基因表達(dá)更高，具有更好的成骨,、成脂和成軟骨能力,，因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肌腱干細(xì)胞采用膠原酶,、中性蛋白酶混合消化法并通過肌腱干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肌腱干細(xì)胞經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R165 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 IL6 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽
小鼠 IL6 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
小鼠 ALK-3 / BMPRIA 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
TMPRSS2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
IL12RB1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
PRKD2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
WHSC1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
APP / PN2 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CFD 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CD309 / VEGFR2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
大鼠肌腱干細(xì)胞化Src原癌基因抗體Anti-FLT1(VEGFR1) Antibody無殼曲霉多少錢
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