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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2025-02-23 20:55:06瀏覽次數(shù)：356
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0381 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| MDA-MB-436 (乳腺癌細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0381 |
商品介紹：
名稱 MDA-MB-436 (乳腺癌細(xì)胞) 別稱MDA MB 436; MDA-Mb-436; MDA-MB436; MDAMB436; MDA-436; MDA436; MD Anderson-Metastatic Breast-436 種屬人類 年齡（性別）女性,，43歲 組織來(lái)源乳腺腺癌胸水轉(zhuǎn)移灶 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)多角形 背景描述MDA-MB-436細(xì)胞源于一名43歲患有乳腺腺癌女性的胸腔積液,；MDA-MB-436細(xì)胞呈多形性，大多數(shù)細(xì)胞在間接免疫熒光染色時(shí)呈現(xiàn)與抗微管抗體的強(qiáng)烈反應(yīng),。 生物安全等級(jí)1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基Leibovitz's L-15＋10μg/ml Insulin＋16μg/ml Glutathione＋15% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:3 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，100% 溫度：37℃ 致瘤性No, in immunosuppressed mice. Yes, in semisolid medium. 基因表達(dá)情況tubulin; actin 注意事項(xiàng)1、該細(xì)胞推薦使用Leibovitz's L-15培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),，Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳,，會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性,； 2、如您沒(méi)有無(wú)二氧化碳的培養(yǎng)箱,，可使用DMEM替代Leibovitz's L-15,，使用DMEM培養(yǎng)基時(shí)即可正常通入5%二氧化碳； 2,、配套專用培養(yǎng)基默認(rèn)Leibovitz's L-15配置,，如需DMEM配方，請(qǐng)聯(lián)系銷售下單備注更改,。 |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
DEFB121 基因全長(zhǎng)ORF克隆
DEFB104B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ATOX1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
DEFB134 基因全長(zhǎng)ORF克隆
DEFB106B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCT7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CPVL 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TAPBPL 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RASSF9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CCBL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MDA-MB-436 (乳腺癌細(xì)胞) 50T 水貂腸炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
RNS培養(yǎng)基 250g
1瓶 Tca-8113細(xì)胞株 Tca-8113 低溫運(yùn)輸和保存
煌綠瓊脂 Brilliant Green Agar 250g
1mL 纖連蛋白 ( 人血 ) Fibronectin(FN) From Human Plasma -20℃保存
50T 副流感病毒Ⅰ型PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存
300µL 兔抗雞IgY,，辣根過(guò)氧化物標(biāo)記 Rabbit Anti-Chicken IgY,HRP Conjugate -20℃保存
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