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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-18 15:48:44瀏覽次數(shù)：297
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0883 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠子宮頸上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0883 |
商品介紹：
名稱 大鼠子宮頸上皮細(xì)胞 2.組織來源：子宮組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠子宮頸上皮細(xì)胞分離自子宮頸組織；子宮頸位于子宮下部,，近似圓錐體,，上端與子宮體相連，下端深入陰道,。陰道頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分：宮頸突入陰道的部分稱宮頸陰道部,，在陰道穹隆以上的部分稱宮頸陰道上部。宮頸的中央為前后略扁的長梭性管腔,，其上端通過宮頸內(nèi)口與子宮腔相連,，其下端通過宮頸外口開口于陰道。內(nèi)外口之間即宮頸管,。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內(nèi)分泌狀態(tài)等而變化,；宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成,。子宮頸可有多種疾病,，包括胚胎發(fā)育異常、炎癥,、瘤樣病變,、良性腫瘤、惡性腫瘤,、損傷,、宮頸性不孕、輔助生育技術(shù),、宮頸與性,、宮頸妊娠等許多問題，體外培養(yǎng)的子宮頸上皮細(xì)胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠子宮頸上皮細(xì)胞采用先膠原酶消化、后組織貼塊法,，結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠子宮頸上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R051 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 LGALS3 基因全長ORF克隆
小鼠 SPINT1 基因全長ORF克隆
小鼠 LGALS7 基因全長ORF克隆
小鼠 CD5 基因全長ORF克隆
小鼠 APP / PN2 基因全長ORF克隆
小鼠 Desmocollin-2 基因全長ORF克隆
小鼠 MS4A1 基因全長ORF克隆
小鼠 ENTPD1 基因全長ORF克隆
小鼠 ADAMTS15 基因全長ORF克隆
小鼠 GRN 基因全長ORF克隆
大鼠子宮頸上皮細(xì)胞硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（2015藥典） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g
3.12-200 U/mL ELISA Kit for Human Cytosolic phospholipase A2
0.156-10 ng/mL 人垂體腺苷酸環(huán)化激活肽類型Ⅰ受體ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人CD163抗原(CD163)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/ml 人腫瘤蛋白D52(Tumor protein D52)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Heparin-binding growth factor 2
78-5000 pg/ml 人基質(zhì)金屬蛋白10(MMP-10/SL-2)ELISA試劑盒
6.25-400 ng/mL ELISA Kit for Human Hepatic triacylglycerol lipase
78-5000 ng/mL 動物源性成分(18S)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.78-50 ng/mL 人芳基硫酸酯A(ASA)ELISA試劑盒
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