詳細介紹
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔),。
2,、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3,、樣品(Sample Diluent):1×20ml/瓶,。
4、標記抗體(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5,、辣根過氧化物酶標記親和素 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6,、標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7,、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9,、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水25倍,。
10,、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注:本公司提供試劑盒免費代測服務(wù),。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員,。
產(chǎn)品全稱:PDHα 丙酮酸脫氫酶αELISA實驗原理
英文名稱:Pyruvate Dehydrogenase Alpha(PDHa)ELISA Kit
貨號:GOY-01E12581
規(guī)格:48T/96T
服務(wù):可提供免費代測服務(wù),,以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等
保存環(huán)境:2-8℃低溫、避光,、防潮
主要成分:酶標板,試劑,標準品等,。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本..需要而未提供。
具有如下優(yōu)點:
一,、高效,、靈敏、特異的抗體,;
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三,、吸附性能好,,空白值低,孔底透明度高的固相載體,;
四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型,;
五,、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費,。
試劑和樣本的控制方法:
一,、試劑 1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照進行,,已獲得國家承認的“三證",,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,只要客戶提前下單,,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,,不必擔心會有過期的試劑,。我司的試劑,值得您選擇,。 2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,,在室溫下放置20-30 min后,,再進行測定,,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,,以滿足后面的測定需求,。
| 二、樣本 1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風濕因子,、補體,、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體,、某些自身抗體等,; 類風濕因子的控制方法: ①用F(ab)2替代完整的IgG; ②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理,; ③檢測抗原時,,可用加入到標本中使RF降解。 |
操作步驟:
1,、準備:從冰箱取出試劑盒,,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2,、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液成原倍的洗滌液,。
3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,,固定于框架上,,分別設(shè)置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,,記錄各孔位置,,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,,再加樣本40μL(即樣本5倍),;空白對照孔不加。
4,、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。
5、洗板:棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
6,、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,,空白對照孔不加。
7,、溫育:重復(fù)4的操作,。
8、洗板:重復(fù)5的操作,。
9,、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,,37℃避光顯色15min,。
10、終止:取出酶標板,,每孔加終止液50μL,,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11,、測定:以空白孔調(diào)零,,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值),。
12,、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,,再根據(jù)樣本的OD值,,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算,。zui終濃度為實際測定濃度乘以倍數(shù),。
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