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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠關節(jié)軟骨細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0999 |
商品介紹：
名稱 大鼠關節(jié)軟骨細胞 2.組織來源：關節(jié)軟骨組織 3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠關節(jié)軟骨細胞分離自關節(jié)軟骨組織,；關節(jié)軟骨屬于透明軟骨,，表面光滑、呈淡藍色,、有光澤,，它是由一種特殊的叫做致密結締組織的膠原纖維構成的基本框架，這種框架呈半環(huán)形,，類似拱形球門,，其底端緊緊附著在下面的骨質上，上端朝向關節(jié)面,，這種結構使關節(jié)軟骨緊緊與骨結合起來而不會掉下來,，同時當受到壓力時候，還可以有少許的變形,，起到緩沖壓力的作用,。在這些纖維之間，散在分布著軟骨細胞,，軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,，這些軟骨細胞維持關節(jié)軟骨的正常代謝。關節(jié)軟骨沒有神經支配,，也沒有血管,，其營養(yǎng)成分必須從關節(jié)液中取得，而其代謝廢物也必須排至關節(jié)液中,，關節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關節(jié)運動,，使關節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行，所以關節(jié)運動對于維持關節(jié)軟骨的正常結構起重要的作用,。關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨陷窩內,。幼稚的關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨組織的表層，單個分布,、體積較小,、呈橢圓形，長軸與關節(jié)軟骨表面平行,，越向深層的關節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形,，細胞核圓形或卵圓形、染色淺,，細胞質弱嗜堿性,，常見數量不一的脂滴。成熟的關節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關節(jié)軟骨陷窩內,，這些關節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,，稱為同源細胞群,。電鏡下，關節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶,，細胞質內有大量的粗面內質網和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體,。在組織切片中，關節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,，在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙,。體外培養(yǎng)的關節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠關節(jié)軟骨細胞采用膠原酶聯(lián)合中性蛋白酶消化制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠關節(jié)軟骨細胞經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R092 換液頻率每3-4天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)梭形,、多角形 傳代特性可傳5代左右,；3代以內狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
狗 FGF7 基因全長ORF克隆
狗 FGF1 基因全長ORF克隆
狗 FGF21 基因全長ORF克隆
狗 IGF1 基因全長ORF克隆
狗 DPYS 基因全長ORF克隆
狗 NTRK2 基因全長ORF克隆
狗 ANGPT2 基因全長ORF克隆
狗 ANGPTL2 基因全長ORF克隆
狗 ANGPTL1 基因全長ORF克隆
狗 ANGPTL3 基因全長ORF克隆
大鼠關節(jié)軟骨細胞0.78-50 ng/mL 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Protein AMBP
HBI創(chuàng)傷弧菌生化鑒定條(GB) 英文名稱： 產品規(guī)格：5條/盒
0.312-20 ng/mL ELISA試劑盒人TM4SF20蛋白
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Melanin-concentrating hormone receptor 1
78-5000 pg/mL 人晚期糖基化終末產物(AGEs)ELISA試劑盒
3.12-200 ng/mL 人熱休克蛋白10(Hsp10)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人閉合蛋白(Occludin)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Myosin-9
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human La-related protein 7
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