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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-19 15:18:07瀏覽次數(shù)：218
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0999 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0999 |
商品介紹：
名稱 大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞 2.組織來源：關(guān)節(jié)軟骨組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞分離自關(guān)節(jié)軟骨組織,；關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨,，表面光滑、呈淡藍(lán)色,、有光澤,，它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架，這種框架呈半環(huán)形,，類似拱形球門,，其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上，上端朝向關(guān)節(jié)面,，這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來而不會掉下來,，同時當(dāng)受到壓力時候，還可以有少許的變形,，起到緩沖壓力的作用,。在這些纖維之間,，散在分布著軟骨細(xì)胞，軟骨細(xì)胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細(xì)胞組成,，這些軟骨細(xì)胞維持關(guān)節(jié)軟骨的正常代謝,。關(guān)節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配，也沒有血管,，其營養(yǎng)成分必須從關(guān)節(jié)液中取得,，而其代謝廢物也必須排至關(guān)節(jié)液中，關(guān)節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關(guān)節(jié)運動,，使關(guān)節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,，所以關(guān)節(jié)運動對于維持關(guān)節(jié)軟骨的正常結(jié)構(gòu)起重要的作用。關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層,，單個分布、體積較小,、呈橢圓形,，長軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行，越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形,，細(xì)胞核圓形或卵圓形,、染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性,，常見數(shù)量不一的脂滴,。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞多2-8個成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi)，這些關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞由同一個母細(xì)胞分裂增殖而成,，稱為同源細(xì)胞群,。電鏡下，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞有突起和皺褶,，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體,。在組織切片中，關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形,，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙,。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞采用膠原酶聯(lián)合中性蛋白酶消化制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R092 換液頻率每3-4天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
狗 FGF7 基因全長ORF克隆
狗 FGF1 基因全長ORF克隆
狗 FGF21 基因全長ORF克隆
狗 IGF1 基因全長ORF克隆
狗 DPYS 基因全長ORF克隆
狗 NTRK2 基因全長ORF克隆
狗 ANGPT2 基因全長ORF克隆
狗 ANGPTL2 基因全長ORF克隆
狗 ANGPTL1 基因全長ORF克隆
狗 ANGPTL3 基因全長ORF克隆
大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞0.78-50 ng/mL 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Protein AMBP
HBI創(chuàng)傷弧菌生化鑒定條(GB) 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：5條/盒
0.312-20 ng/mL ELISA試劑盒人TM4SF20蛋白
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Melanin-concentrating hormone receptor 1
78-5000 pg/mL 人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒
3.12-200 ng/mL 人熱休克蛋白10(Hsp10)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人閉合蛋白(Occludin)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Myosin-9
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human La-related protein 7
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