NCI-H929 (骨髓瘤細(xì)胞)的相關(guān)*：細(xì)胞DHPR受體蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次
細(xì)胞DHPR受體蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒 10/50 次
DHPR受體蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 5次
DHPR受體蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 5次
DHPR受體蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 25次
細(xì)胞CYP1A2蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒 10/20次

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。

產(chǎn)品屬性：   

商品介紹：

 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二,、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

 LPCAT2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 SNX4 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 HN1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 NHP2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 CARHSP1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 PTS 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 FAM107A 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 TPD52L1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 PFN1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

 CHRAC1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

NCI-H929 (骨髓瘤細(xì)胞)50次 亞硫酸氫鹽DNA修飾試劑盒 Bisulfite DNA Modification Kit 常溫保存

100mL MOPS Buffer,0.5M,pH7.5   MOPS Buffer,0.5M,pH7.5   常溫保存

100次 鏈霉菌 PCR Mix 6（RPB2） Bacterial DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

2 ug pMDL pMDL 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存

1/2MS培養(yǎng)基（不含瓊脂和蔗糖） 1/2 MS Medium(without agar or sucrose) 250g

2 ug pLP2 pLP2 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

葡萄球菌增菌肉湯 Staphylococcus Enrichment Broth 250g