HFSF [HFSF-PI3] (胚胎眼鞏膜成纖維細胞)的相關(guān)*：食物銅離子濃度比色法定量檢測試劑盒 20次
環(huán)境銅離子濃度比色法定量檢測試劑盒 20次
細胞銅離子濃度熒光定量檢測試劑盒 20次
組織銅離子濃度熒光定量檢測試劑盒 20次
體液銅離子濃度熒光定量檢測試劑盒 20次
食物銅離子濃度熒光定量檢測試劑盒 20次

產(chǎn)品屬性： 

商品介紹：

冷凍保存細胞之方法,？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；

3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；

5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二,、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；

4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；

5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

 ESRRA 基因全長ORF克隆

 VWA2 基因全長ORF克隆

 PPP4R2 基因全長ORF克隆

 SYT15 基因全長ORF克隆

 RASSF7 基因全長ORF克隆

 DAZAP2 基因全長ORF克隆

 PRICKLE1 基因全長ORF克隆

 AFAP1L1 基因全長ORF克隆

 PKP1 基因全長ORF克隆

 ALOXE3 基因全長ORF克隆

HFSF [HFSF-PI3] (胚胎眼鞏膜成纖維細胞)50T 沙門氏菌invA基因(284bp)常規(guī)PCR檢測試劑盒  低溫運輸,，-20℃保存

0.5 mg LPS （TLR4激活劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL HEPES Buffer,1M,pH6.5  HEPES Buffer,1M,pH6.5  常溫保存

1mL 小牛胸腺DNA溶液（10mg/mL） Calf Thymus DNA Solution -20℃保存

125mL RIPA Buffer,2X  RIPA Buffer,2X  常溫保存

1 管 C600大腸桿菌 C600 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRetroX-IRES-DsRedExpress pRetroX-IRES-DsRedExpress 低溫運輸，-20℃保存