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詳細介紹
產品屬性：
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠腦膜成纖維細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1373 |
商品介紹：
名稱 小鼠腦膜成纖維細胞 2.組織來源：腦膜組織 3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 小鼠腦膜細胞分離自腦膜組織,；腦膜是顱骨與腦間的隔膜,，一共有三層，由外向內為硬腦膜,、蛛網膜和軟腦膜,。腦膜細胞圍繞著大腦，參與中樞神經系統(tǒng)的正常發(fā)育,，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細胞外基質,、組織放射狀膠質細胞網絡和小腦皮層分層結構。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠腦膜成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠腦膜成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產品貨號CM-M239 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,，并經過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 GPNMB / Osteoactivin 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
C7 / Complement component 7 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
NRG1-beta 1 (ECD) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
/ 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
B7-H4 / B7S1 / B7x 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠腦膜成纖維細胞L-α-磷脂酰-β-花生四烯酰-γ-硬脂酰 10 mg/mL 氯,即1ml大黃素甲 分析標準品,，>98%Anti-phospho-c-Abl(Tyr412) 化非受體激c-Abl抗體
氫鈉銨 AR大黃酸 98%Anti-phospho-c-Abl(Tyr245) 化非受體激c-Abl抗體
3-噻吩-2-羧酰 97%青藤堿 分析標準品，≥97%Anti-phospho-c-Abl(Tyr204) 化非受體激c-Abl抗體
4--2,，6-二氯吡 97%青藤堿 97%Anti-phospho-c-Abl(Thr735) 化非受體激c-Abl抗體
8-芘-1,，3，6-三磺酸三鈉鹽 熒光級(-)-莽草酸 98%Anti-phospho-c-Abl(Tyr89) 化非受體激c-Abl抗體
4-苯甲脒 97%(-)-莽草酸 分析標準品,，≥98%Anti-ABL2 ABL2蛋白抗體
4-喹哪 98% 98%Anti-ABI1 ABI1/SSH3BP1蛋白抗體
2-辛酸 98%鹽酸坦索羅辛 98%Anti-ABP 雄結合蛋白抗體
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