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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-13 09:58:40瀏覽次數(shù)：273
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0767 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠乳腺上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0767 |
商品介紹：
名稱 大鼠乳腺上皮細胞 2.組織來源：乳腺組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠乳腺上皮細胞分離自乳腺組織；乳腺是復(fù)管泡狀皮膚腺,，主要由腺上皮細胞組成,，并具有特殊的泌乳功能,。在妊娠期，導(dǎo)管末梢發(fā)育成腺泡,；近年來的許多研究都表明乳腺癌,、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細胞（MEC）有密切聯(lián)系，體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開展的關(guān)鍵步驟,。乳腺是乳房的腺體組織,，乳腺由導(dǎo)管和腺泡組成，腺泡是分泌乳汁的重要部分,。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)激素和局部合成的生長因子共同調(diào)控,，其中乳腺表達的生長因子對乳腺上皮細胞的增殖、分化,、凋亡產(chǎn)生極大的影響,。乳腺上皮細胞分離自分娩后3-5天的乳腺組織，為貼壁生長型細胞,，呈多角形,、圓形以及短梭形；乳腺上皮細胞主要功能即生乳功能,。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠乳腺上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠乳腺上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R020 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5,、PBS沖洗細胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
Syndecan-2 基因全長ORF克隆
RBP4 基因全長ORF克隆
IFNW1 基因全長ORF克隆
Spp1 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆
HSPB1 基因全長ORF克隆
IL13Ra2 基因全長ORF克隆
IFNA10 基因全長ORF克隆
GranzymeH 基因全長ORF克隆
IFNA8 基因全長ORF克隆
ICAM-1 / CD54 基因全長ORF克隆
大鼠乳腺上皮細胞0.156-10 ng/mL 人肌球蛋白重鏈1ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Glutaminyl-peptide cyclotransferase
0.156-10 ng/mL 人甲基多巴A亞基α(MEP1A)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL. 人3-甘油醛脫氫(GAPDH)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL 人心營養(yǎng)素樣細胞因子1(CLCF1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Alpha-fetoprotein
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Patatin-like phospholipase domain-containing protein 2
沙氏葡萄糖瓊脂 英文名稱：Sabouraud’s Glucose Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Laminin subunit alpha-3
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Arachidonate 12-lipoxygenase, 12S-type
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