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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2025-02-21 16:28:44瀏覽次數(shù)：358
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0847 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 兔臍帶間充質(zhì)干細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0847 |
商品介紹：
名稱 兔臍帶間充質(zhì)干細胞 2.組織來源：臍帶組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 兔臍帶間充質(zhì)干細胞分離自臍帶,；臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的,。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。當卵黃囊及其血管退化,，臍動脈和臍靜脈就發(fā)達起來,，在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質(zhì)。在子宮中,，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換,。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒,。最后由子宮靜脈將來自胎兒的代謝廢物運走,，某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒。臍帶中含有大量的干細胞,，干細胞是生命的種子,，它會分化成機體的各種細胞，結(jié)出各種不同的果實——血液細胞,、神經(jīng)細胞,、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新,、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體,；這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量，又可進一步分化為各種組織細胞,，從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用,。間充質(zhì)干細胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導(dǎo)條件下,，可分化為多種造血細胞以外的組織細胞，并具有造血支持,、免疫調(diào)節(jié),、組織修復(fù)等作用；目前,，多用于風(fēng)濕免疫疾病的治療,。間充質(zhì)干細胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞，存在于骨髓,、脂肪組織,、臍血及多種胎兒組織,。它可分泌多種細胞因子及生長因子，促進造血干細胞（HSC）的增殖與分化,。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié),、抗炎和組織修復(fù)作用，可減輕移植物抗宿主?。?/span>GVHD）及其他移植相關(guān)并發(fā)癥,。 5.方法簡介： 實驗室分離的兔臍帶間充質(zhì)干細胞采用組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的兔臍帶間充質(zhì)干細胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-Rb041 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳3-5代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5,、PBS沖洗細胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 INHBC 基因全長ORF克隆
小鼠 TXN1 基因全長ORF克隆
小鼠 STK32B 基因全長ORF克隆
小鼠 RP2H 基因全長ORF克隆
小鼠 CDK16 基因全長ORF克隆
小鼠 CSNK2A1 基因全長ORF克隆
小鼠 TRF 基因全長ORF克隆
小鼠 SIRPB1A 基因全長ORF克隆
小鼠 KLRB1F 基因全長ORF克隆
小鼠 THBD 基因全長ORF克隆
兔臍帶間充質(zhì)干細胞78-5000 pg/mL 人己糖激(HK)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人β微精原蛋白（Beta-microseminoprotein/PRSP）ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Androgen-dependent TPF1-regulating protein
BLB瓊脂 英文名稱：BLB agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
78-5000 pg/mL 人預(yù)測前mRNA剪接因子ATP依賴性RNA解旋DHX32(DHX32)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Platelet-derived growth factor D
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human HLA class I histocompatibility antigen, alpha chain G
抗生素檢定培養(yǎng)基4號 英文名稱：Antibiotic Agar NO.4 產(chǎn)品規(guī)格：250g
15.6-1000 pg/mL 人殼三糖1(Chitotriosidase-1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Nuclear receptor coactivator 1
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