詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
兔肺微血管內皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0707 |
商品介紹:
名稱 兔肺微血管內皮細胞 2.組織來源:肺組織 3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 兔肺微血管內皮細胞分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管,、支氣管等)與喉,、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,,鼻為肺之外竅,。微血管內皮細胞密切參與包括再生、發(fā)育,、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應,。細胞呈梭形或多角形,形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列,。肺微血管內皮細胞構成半選擇性屏障,,該屏障對于肺氣體交換,調節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質之間的流動具有重要意義,。 5.方法簡介: 實驗室分離的兔肺微血管內皮細胞采用組織貼塊法并結合內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的兔肺微血管內皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%) 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產品貨號CM-Rb006 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)內皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%,;CO2,,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,, 以防止冰晶過大,,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),,懸浮細胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,取放蓋玻片時動作要輕,;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
BIRC3 基因全長ORF克隆
TFR2 基因全長ORF克隆
TFRC 基因全長ORF克隆
TF 基因全長ORF克隆
CSNK2A2 基因全長ORF克隆
GPR56 基因全長ORF克隆
HK3 基因全長ORF克隆
CROT 基因全長ORF克隆
ANGPTL2 基因全長ORF克隆
CCNA1 基因全長ORF克隆
兔肺微血管內皮細胞0.78-50 ng/mL 人胰島再生源蛋白3 - alpha(REG-3-alpha)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL 人組織蛋白F(CATSF)ELISA試劑盒
LG培養(yǎng)基 英文名稱:(Linden Grain Medium) 產品規(guī)格:250g
硫細菌培養(yǎng)基 英文名稱:Medium-sulfur bacteria 產品規(guī)格:250g
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Nicotinamide phosphoribosyltransferase
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Perilipin-1
0.312-20 ng/mL. 人白細胞彈性蛋白抑制劑(LEI)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Procollagen galactosyltransferase 1
78-5000 pg/mL 人神經(jīng)介素U(NMU)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human RuvB-like 1