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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| CAL 27 (舌鱗癌細胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0263 |
商品介紹：
名稱 CAL 27 (舌鱗癌細胞) 別稱Cal-27; CAL 27; Cal 27; CAL27; Cal27; Centre Antoine Lacassagne-27 種屬人類 年齡（性別）男性,，56歲 組織來源舌 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)上皮細胞樣 背景描述CAL 27細胞是由J·Gioanni于1982年建系，源自一位56歲白人男性的舌頭中倍的病變部位,；CAL 27細胞角蛋白強陽性,。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基DMEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~20-45小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, solid tumors developed within 6 weeks in nude mice inoculated with 2×10^6 cells subcutaneously. |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5,、PBS沖洗細胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠血管生成素1(ANG-1)免疫試劑盒進口,、分裝
大鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)免疫試劑盒進口,、分裝
大鼠促酰化蛋白(ASP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)免疫試劑盒進口,、分裝
大鼠胱硫醚-γ-裂解(CSE)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
抗BP180抗體(anti-BP180-Ab)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
酪氨酰DNA 二酯1(TDP1)免疫試劑盒*直銷
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(vWF)免疫試劑盒進口,、組裝
大鼠26S蛋白體(26S PSM)免疫試劑盒*直銷
大鼠催產(chǎn)素(OT)免疫試劑盒進口、組裝
CAL 27 (舌鱗癌細胞) 1g 埃文斯藍 Evans Blue 室溫干燥保存
阪崎腸桿菌檢驗培養(yǎng)基
100mL 印跡膜抗體稀釋液 Antibody Dilution Buffer 4℃保存
2 ug SD1211-chip- 1 SD1211-chip- 1 低溫運輸,，-20℃保存
48次 動態(tài)顯色法內(nèi)毒素定量試劑盒
2 ug pEZZ18 pEZZ18 低溫運輸,，-20℃保存
PH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液 500ml*20瓶
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