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詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 小鼠胸腺淋巴細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1269 |
商品介紹：
名稱 小鼠胸腺淋巴細(xì)胞 2.組織來(lái)源：胸腺組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 小鼠胸腺淋巴細(xì)胞分離自胸腺組織；胸腺是機(jī)體的重要淋巴器官,，其功能與免疫緊密相關(guān),，是T細(xì)胞分化、發(fā)育,、成熟的場(chǎng)所,。其還可以分泌胸腺激素及激素類物質(zhì)，具內(nèi)分泌機(jī)能的器官,。位于胸腔前縱隔,。胚胎后期及初生時(shí),，是一生中重量相對(duì)最大的時(shí)期,。隨年齡增長(zhǎng),，胸腺繼續(xù)發(fā)育,；此后胸腺逐漸退化，淋巴細(xì)胞減少,，脂肪組織增多,。胸腺的結(jié)構(gòu)表面有結(jié)締組織被膜，結(jié)締組織伸入胸腺實(shí)質(zhì)把胸腺分成許多不*分隔的小葉,。小葉周邊為皮質(zhì),，深部為髓質(zhì)。皮質(zhì)不*包圍髓質(zhì),，相鄰小葉髓質(zhì)彼此銜接,。皮質(zhì)主要由淋巴細(xì)胞和上皮性網(wǎng)狀細(xì)胞構(gòu)成，胞質(zhì)中有顆粒及泡狀結(jié)構(gòu),。網(wǎng)狀細(xì)胞間有密集的淋巴細(xì)胞,。胸腺的淋巴細(xì)胞又稱為胸腺細(xì)胞，在皮質(zhì)淺層細(xì)胞較大,，為較原始的淋巴細(xì)胞,。中層為中等大小的淋巴細(xì)胞，深層為小淋巴細(xì)胞,。從淺層到深層為造血干細(xì)胞增殖分化為小淋巴細(xì)胞的過(guò)程,。皮質(zhì)內(nèi)還有巨噬細(xì)胞，無(wú)淋巴小結(jié),。髓質(zhì)中淋巴細(xì)胞少而稀疏,，上皮性網(wǎng)狀細(xì)胞多而顯著。形態(tài)多樣,，胞質(zhì)中有顆粒及泡狀結(jié)構(gòu)，為其分泌物,，尚有散在的圓形的胸腺小體,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胸腺淋巴細(xì)胞采用機(jī)械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為1×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胸腺淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)檢測(cè),，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M197 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性懸浮 細(xì)胞形態(tài)圓形 傳代特性不增殖,；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 Prostasin / PRSS8 (aa 30-289) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
Thyroid peroxidase / TPO (257 Ser/Ala, 725 Pro/Thr) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CSF1R / MCSF Receptor / CD115 (aa 543-922) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 IL3 / interleukin 3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 NEK3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
RNASET2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
TPP1 / CLN2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
GM2A 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠胸腺淋巴細(xì)胞羅丹明B ≥99.0% (HPLC) 2-氯-4-氟吡 98%INS(Human Insulin) ELISA Kit 人胰島素
羅丹明B 分析標(biāo)準(zhǔn)品,，>99.0% (HPLC) 3-氯-2-氟吡 98%Human C-Peptide ELISA Kit 人C肽
紅熒烯 99%4-氯-3-氟吡 95%HCG(Human Chorionic Gonadotrophin) ELISA Kit 人絨毛膜促性腺
海藻酸鈉 AR，90%2-基-5-氟吡 98%Beta-CG(Human Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit 人絨毛膜促性腺β
乙炔化鈉,二甲苯溶液 18 wt%二甲苯溶液2-基-3,5-二氟吡 98%LH(Human luteotropic hormone) ELISA Kit 人促黃體
琥珀酰氯 96%3-氯-5-(三氟甲基)苯 97%PS(Human Prednisolone) ELISA Kit 人龍
L-乳酸鈉 98%2-氯-5-硝基三氟甲苯 98% LEP(Human Leptin) ELISA kit 人瘦素
化四苯砷 97%2-氯-4-甲基三氟甲苯 98%LR/Ob-R(Human Leptin receptor) ELISA KIT 人苗條素受體
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