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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-24 08:45:32瀏覽次數(shù)：251
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1325 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠心臟微血管周細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1325 |
商品介紹：
名稱(chēng) 大鼠心臟微血管周細(xì)胞 2.組織來(lái)源：心臟組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠心臟微血管周細(xì)胞分離自心臟組織,；心臟是脊椎動(dòng)物身體中最重要的一個(gè)器官,，主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力，把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分,。心臟由心肌構(gòu)成，左心房,、左心室,、右心房、右心室四個(gè)腔組成,。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開(kāi),，故互不相通,，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,，而不能倒流,。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng)，向器官,、組織提供充足的血流量,，以供應(yīng)氧和各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳,、無(wú)機(jī)鹽,、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能,。心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用,，在心臟血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來(lái)大量研究表明,，心肌微血管周細(xì)胞的功能和病理改變直接影響心肌細(xì)胞功能,，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,，其作為體外研究的細(xì)胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機(jī)制和細(xì)胞間旁分泌細(xì)胞生長(zhǎng)因子研究中起著重要作用,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心臟微血管周細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心臟微血管周細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R220 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳3-5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 CD150 / SLAM / SLAMF1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 SIRP alpha / CD172a 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 CLEC4D / CLECSF8 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
雪貂 IFNG / Interferon Gamma 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 GM-CSF / CSF2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠心臟微血管周細(xì)胞Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗兔IgGAnti-SCRIB Antibody鹽酸小檗6078-17-7價(jià)格
Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SCRIB Antibodyγ-蟾蜍它465-11-2說(shuō)明書(shū)
Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SCRIB Antibody雙醋瑞因13739-02-1說(shuō)明書(shū)
Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC1 Antibodyα- tocopherolquinon7559-04-8說(shuō)明書(shū)
Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SCTR Antibody槐定堿6882-68-4說(shuō)明書(shū)
PE-CY5標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC1 Antibody尿苷58-96-8品牌
PE-Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC3 Antibodycroverin76475-17-7說(shuō)明書(shū)
Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC4 Antibody(原貨號(hào)PB0464)n-feruloyloctopamine66648-44-0品牌
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