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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-19 14:28:08瀏覽次數(shù)：230
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0967 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0967 |
商品介紹：
名稱(chēng) 小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 2.組織來(lái)源：大隱靜脈組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自大隱靜脈；大隱靜脈起于足背靜脈弓內(nèi)側(cè)端,，經(jīng)內(nèi)踝前方,，沿小腿內(nèi)側(cè)緣伴隱神經(jīng)上行，經(jīng)股骨內(nèi)側(cè)髁后方,，進(jìn)入大腿內(nèi)側(cè)部,，與股內(nèi)側(cè)皮神經(jīng)伴行，逐漸向前上,，在恥骨結(jié)節(jié)外下方穿隱靜脈裂孔,，匯入股靜脈，其匯入點(diǎn)稱(chēng)為隱股點(diǎn),。有5條屬支：旋髂淺靜脈,、腹壁淺靜脈、外靜脈,、股內(nèi)側(cè)淺靜脈和股外側(cè)淺靜脈,，它們匯入大隱靜脈的形式多樣，相互間吻合豐富,。大隱靜脈曲張行高位結(jié)扎時(shí),，須分別結(jié)扎、切斷各屬支,，以防復(fù)發(fā),。大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)維持大隱靜脈動(dòng)態(tài)平衡起著重要作用。它們合成,、分泌凝血和纖溶系統(tǒng)的激活因子和抑制因子,、影響血小板粘附和聚集的調(diào)節(jié)因子；大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞還釋放控制細(xì)胞增殖和調(diào)節(jié)血管壁緊張度的分子,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M080 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 NPC2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 NGP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 CNFN 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 BPIFA2F 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 SIN3B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 APOH 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 DAD1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 PRL8A9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 TAF9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 RTN1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞0.312-20 ng/mL 人腺苷蛋脫羧(AMD1)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Fascin-2
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Type I iodothyronine deiodinase
沙門(mén),、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS) 英文名稱(chēng)： 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL 人氧代固醇受體LXR-α(Oxysterols receptor LXR-alpha)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein B-100
3.12-200 ng/mL 人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL 人膜相關(guān)磷脂A2(Phospholipase A2, membrane associated)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL 人早期活化抗原CD69(CD69)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL 人前列腺素D合成(PGDS)ELISA試劑盒
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