產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
兔肌腱干細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0701 |
商品介紹:
名稱(chēng) 兔肌腱干細(xì)胞 2.組織來(lái)源:肌腱組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 兔肌腱干細(xì)胞分離自肌腱組織,;肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織,,便于肌肉附著和固定,。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上,,是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動(dòng)不同骨的運(yùn)動(dòng),。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分,,肌腹由肌纖維構(gòu)成,,色紅質(zhì)軟,,有收縮能力,肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成,,色乳白較硬,,沒(méi)有收縮能力。肌腱把骨骼肌附著于骨骼,。長(zhǎng)肌的肌腱多呈圓索狀,,闊肌的肌腱闊而薄,呈膜狀,,又叫腱膜,。此處的肌腹即為通常所說(shuō)的紅肌,而肌腱即為白肌,,分別控制肌肉的力量,、爆發(fā)力和耐力。肌腱干細(xì)胞(TSCs)是一種來(lái)源于肌腱組織的間充質(zhì)干細(xì)胞,,其具有多向分化潛能,,并且在外源性前列腺素E2作用下異常分化。體外培養(yǎng)時(shí)該細(xì)胞群具有克隆形成能力,、自我更新及多向分化潛能等干細(xì)胞的普遍特性,。肌腱干細(xì)胞可以被誘導(dǎo)向脂肪細(xì)胞、軟骨樣細(xì)胞,、骨細(xì)胞分化,;在裸鼠模型中,肌腱干細(xì)胞還可以形成肌腱樣組織,,軟骨樣組織以及腱-骨連接樣組織等,。相比骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞而言,TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力,,軟骨相關(guān)基因和肌腱相關(guān)基因表達(dá)更高,,具有更好的成骨、成脂和成軟骨能力,,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞,。 5.方法簡(jiǎn)介: 實(shí)驗(yàn)室分離的兔肌腱干細(xì)胞采用膠原酶、中性蛋白酶混合消化法并通過(guò)肌腱干細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè): 實(shí)驗(yàn)室分離的兔肌腱干細(xì)胞經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-Rb005 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳5代左右,;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,,95%;CO2,,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,,造成細(xì)胞大量死亡,,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
CTLA4 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CASP4 轉(zhuǎn)錄變體alpha 基因全長(zhǎng)ORF克隆
源IFITM1 基因cDNA克隆
GADD45A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PRR5 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
HMGB3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
EPS8 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CASP5 轉(zhuǎn)錄變體a 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CASP9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD69 基因全長(zhǎng)ORF克隆
兔肌腱干細(xì)胞1.56-100 ug/mL 人肌酸激B(Creatine kinase B-type)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人肝配蛋白A受體3(EPHA3)ELISA試劑盒
0.39-25 ng/mL ELISA Kit for Prostaglandin F2alpha
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 4
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Dopamine beta-hydroxylase
0.156-10 ng/ml ELISA Kit for Human Thromboxane-A synthase
改良CCD瓊脂基礎(chǔ)(mCCD) 英文名稱(chēng):CCDA Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g
慶大(100IU)和亞碲酸鉀(1mg)混合液 英文名稱(chēng): 產(chǎn)品規(guī)格:1ml*5支/盒
3.12-200 ng/mL 人細(xì)胞分裂周期因子42(CDC42)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Glycosaminoglycan xylosylkinase