詳細(xì)介紹
產(chǎn)品介紹:
名稱 大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞 2.組織來(lái)源:支氣管組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞分離自支氣管組織,;支氣管(Bronchi),,是指由支氣管分出的各級(jí)分枝,由支氣管分出的一級(jí)支氣管,,即左,、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,,前者較細(xì)長(zhǎng),,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,,所以經(jīng)支氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管,。支氣管和支氣管還有以區(qū)別就是,支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架,,而支氣管不是,。支氣管平滑肌細(xì)胞主要功能:①支氣管平滑肌細(xì)胞能維持支氣管張力,保持支氣管形態(tài),;②支氣管平滑肌特異的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和調(diào)節(jié)機(jī)制是支氣管正常生理功能的基礎(chǔ),;③支氣管平滑肌通過(guò)分泌細(xì)胞因子和趨化因子等促炎介質(zhì),發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能,。支氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,,胞漿豐富,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏,;細(xì)胞密度低時(shí),,常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。 5.方法簡(jiǎn)介: 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè): 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R197 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,,95%,;CO2,5% |
公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),,質(zhì)量有保證,、*、實(shí)驗(yàn)效果好,,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),,同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書,、規(guī)格,、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞 |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號(hào) | GOY-01X1270 |
細(xì)胞特點(diǎn)及處理:
產(chǎn)品特點(diǎn): 1,、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。 2,、 可以處理各種細(xì)菌菌體,,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3,、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí),。 4、 采用溫和的中性裂解組分,,保持蛋白活性,。 5、 含蛋白穩(wěn)定劑,,提取的蛋白穩(wěn)定,。 6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),,背景干擾低,。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化,。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑,;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,,包括絲氨酸蛋白酶,、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等,。 8,、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容,。 | 細(xì)胞處理: 1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。 2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。 對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法: 1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。 3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。 4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細(xì)胞培養(yǎng)技巧:
一,、凍存時(shí)的注意事項(xiàng): 1. 在冷凍保存之前,,應(yīng)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細(xì)胞密度為80 – 90 %最佳 2. 冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否保有其*性質(zhì),,例如是否有雜細(xì)胞或者支原體等,。 3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,,勿作多次解凍,。使用的甘油也應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí),以高壓蒸汽 滅菌后避光保存,。在開(kāi)啟后一年內(nèi)使用,,因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。 4. 冷凍保存的細(xì)胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細(xì)胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細(xì)胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,,細(xì)胞濃度不要太高,,某些雜交瘤會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24 小時(shí)后。 4-3.貼壁腫瘤細(xì)胞: 1 x 10^6,,依細(xì)胞種類而異,。腺癌類的細(xì)胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml,。 4-4. 懸浮細(xì)胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細(xì)胞須至少5 x 10^6 cells/ml,。 5. 冷凍保護(hù)劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細(xì)胞之冷凍條件,,在做冷凍保存之同時(shí),,亦應(yīng)作一個(gè)backup culture,以防止冷凍失敗,。
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使用方法:
收到細(xì)胞后,,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。 1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,,75%酒精消毒,,拆下封口膜,放入37℃,,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。 2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 3. 細(xì)胞傳代 1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次,; 2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,,37℃溫浴3min左右,;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,,再加入*培養(yǎng)液終止消化,; 3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,,放入37℃,,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 4) 待細(xì)胞*貼壁后,,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。 |
下列是公司正銷售的產(chǎn)品:
ENTPD5 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 XCL1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 SPG21 / ACP33 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
MKK6 / MEK6 / MAP2K6 (207 Ser/Asp, 211 Thr/Asp) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
狗 IL5 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 METAP2 / MAP2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
XCL2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
PRC1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
SerpinB3 / SCCA-1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞DNA結(jié)合抑制因子2抗體Human TNFAIP8L2 ELISA Kit人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成抗體(OJ/IleRS)Elisa測(cè)定試劑盒
粒趨化蛋白2抗體Human TNIP1 ELISA Kit月季花染料法PCR鑒定試劑盒
GATA結(jié)合蛋白5抗體Human TNK1 ELISA Kit小鼠5羥色(5-HT)Elisa測(cè)定試劑盒
生長(zhǎng)分化因子9抗體Human TNIP2 ELISA Kit大鼠解整合素樣金屬蛋白9(ADAM9)Elisa測(cè)定試劑盒
促代謝型谷受體4抗體Human TMEM54 ELISA Kit豬可溶性間粘附分子1(sICAM-1)Elisa測(cè)定試劑盒
GST標(biāo)簽蛋白抗體Human TMEM55B ELISA Kit兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)Elisa測(cè)定試劑盒
磷脂酰基蛋白聚糖-4抗體Human TMEM59 ELISA Kit鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激2α抗體流式組化
眼鏡蛇蛇蛋白抗體Human PMCHL1(Putative pro-MCH-like protein 1) ELISA Kit載脂蛋白A1抗體流式組化