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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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—— 銷(xiāo)售熱線(xiàn) ——
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2025-02-21 08:50:49瀏覽次數(shù)：282
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1249 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1249 |
商品介紹：
名稱(chēng) 大鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞 2.組織來(lái)源：小腸組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞分離自小腸組織,；小腸位于腹中,，上端接幽門(mén)與胃相通，下端通過(guò)闌門(mén)與大腸相連,，是食物消化吸收的主要場(chǎng)所,。小腸盤(pán)曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門(mén),，下接盲腸,，分為十二指腸、空腸和回腸三部分,。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,，因?yàn)槭澄锝?jīng)過(guò)小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動(dòng)的機(jī)械性消化后,，基本上完成了消化過(guò)程,，同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜,、粘膜下層,、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,，粘膜有許多絨毛,，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺,，其開(kāi)口位于絨毛根部之間,。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切；構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞,、杯狀細(xì)胞,、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,，接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,，絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣,。Cajal間質(zhì)細(xì)胞（ICC）是一類(lèi)主要分布于胃腸道的間質(zhì)細(xì)胞,，是胃腸道的起搏細(xì)胞和信號(hào)傳導(dǎo)細(xì)胞，與肌細(xì)胞以及末梢神經(jīng)元有著緊密的關(guān)系,，具有激發(fā)和促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)的作用,。借助于電子顯微鏡技術(shù)，清楚觀(guān)察到了ICC位置分布和內(nèi)部精細(xì)結(jié)構(gòu),；應(yīng)用免疫熒光等生化技術(shù),，發(fā)現(xiàn)了其特殊表達(dá)的c-kit蛋白,；利用電生理技術(shù)，得知多種胃腸動(dòng)力障礙疾病也與其異常有關(guān),。多年來(lái),，學(xué)者逐漸在胃腸道、膽道,、膀胱,、子宮等部位發(fā)現(xiàn)了ICC的蹤跡，并試圖闡述其與某些疾病的發(fā)生機(jī)制,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞采用膠原酶消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R188 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
REG4 / RELP / GISP CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 HVEM / TNFRSF14 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
TCN2 / Transcobalamin-II CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 Follistatin / FST ( FS288 ) CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 Frizzled-5 / FZD5 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 R-Spondin 1 / RSPO1 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
Interferon beta / IFN-beta / IFNB CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
IL27 / Interleukin-27 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 / BDNF CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞D-異抗壞血酸 99%4-正基苯酸 97%Anti-Phospho-VASP (Ser239) 化血管擴(kuò)張激磷蛋白抗體
D-異抗壞血酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品4-正氧基苯酸 97%Anti-VAT 囊泡乙酰通道抗體
D-異抗壞血酸 ≥99%, FCC, Kosher4-三氟甲基硫代苯甲酰 98%Anti-VCAM-1/CD106 血管內(nèi)皮粘附分子抗體
核黃素 98%4-三氟甲氧基苯酸 98%Anti-VCAM-1 血管內(nèi)皮粘附分子抗體
D-核糖 CP,98%3,4,5-三氟苯酸 97%Anti-LAMP-1/CD107a 溶體相關(guān)膜蛋白1抗體
D-核糖 ≥99%（HPLC)對(duì)酸 97%Anti-VCP 含纈酪肽蛋白抗體
D-核糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品,，>99.5%(HPLC)4-(三氟甲基)苯酸 98%Anti-VDAC 等電壓依賴(lài)性陰離子通道抗體
D-核糖 用于培養(yǎng),，≥99%（HPLC)4-(反-4-基環(huán)己基)苯 98%Anti-VDCC-L alpha L-型電壓依賴(lài)型鈣通道α抗體
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