BT-549 (乳腺管癌細(xì)胞) 的相關(guān)*：DRBC培養(yǎng)基 250(g)
V-P半固體瓊脂 250(g)
改良麥康凱肉湯基礎(chǔ)（CT-MAC） 250(g)
NTM 培養(yǎng)基 250用于淋球的分離培養(yǎng)(Quelab方法)
過敏測試診斷瓊脂 (D.S.T.A.) (CM0261) Oxoid　
酵母提取物瓊脂(CM0019) Oxoid　
甘鹽瓊脂 金的分離

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。

產(chǎn)品屬性：   

商品介紹：

 

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>

2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

小鼠17-酮類固醇(17-KS)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

胸苷酸合成(TS)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝

大鼠Rho鳥苷酸交換因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝

大鼠腎損傷分子1(Kim-1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠載脂蛋白H(Apo-H)免疫試劑盒*直銷

乙酰轉(zhuǎn)移(ChAT)免疫試劑盒*直銷

可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

血吸蟲抗體(IgG)免疫試劑盒*直銷

組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A(MICA)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝

小鼠糖類抗原199(CA199)免疫試劑盒*直銷

BT-549 (乳腺管癌細(xì)胞) 100mL Imidazole Buffer（咪唑緩沖液）,0.5M,pH6.5  Imidazole Buffer,0.5M,pH6.5  常溫保存

5ug ROX參考染料II ROX Reference Dye II  4℃或-20℃避光保存

2 ug pLVET-tTR-KRAB pLVET-tTR-KRAB 低溫運輸，-20℃保存

*瓊脂培養(yǎng)基 Complete Agar Medium 250g

2 ug pIJ8860 pIJ8860 低溫運輸,，-20℃保存

無機鹽培養(yǎng)基 Inorganic Salt Medium 250g

500g 腦心浸液 Bacto Brain Heart Infusion 4℃保存