產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
胎盤絨毛膜細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0885 |
商品介紹:
名稱 胎盤絨毛膜細(xì)胞 2.組織來源:胎盤組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 人胎盤絨毛膜細(xì)胞分離自胎盤組織,;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成,。胎兒在子宮中發(fā)育,,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性,。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,,是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊,、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤,。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后,,在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起,以細(xì)胞滋養(yǎng)層為中軸,,外裹合體滋養(yǎng)層,,稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸,,使初級干絨毛變成了次級干絨毛,。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織,并與胚體內(nèi)的血管相通時,,次級干絨毛改稱三級干絨毛,。三級干絨毛末端的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞形成細(xì)胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育,,叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤,,而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。 5.方法簡介: 實(shí)驗(yàn)室分離的人胎盤絨毛膜細(xì)胞采用胰蛋白酶-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測: 實(shí)驗(yàn)室分離的人胎盤絨毛膜細(xì)胞經(jīng)hCG免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml) 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H052 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形,、多角形 傳代特性可傳3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,,95%;CO2,,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,,造成細(xì)胞大量死亡,,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些,。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 SLITRK1 基因全長ORF克隆
小鼠 LRIG1 基因全長ORF克隆
小鼠 Integrin alpha1 基因全長ORF克隆
小鼠 HHIP 基因全長ORF克隆
小鼠 FZD4 基因全長ORF克隆
小鼠 CCL11 基因全長ORF克隆
小鼠 SERPINA3G 基因全長ORF克隆
小鼠 SERPINA3C 基因全長ORF克隆
小鼠 SERPINB6A 基因全長ORF克隆
小鼠 TPO R 基因全長ORF克隆
胎盤絨毛膜細(xì)胞1.56-100 mIU/mL 人ATP結(jié)合盒亞家族A7(ABCA7)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人α-球蛋白轉(zhuǎn)錄因子CP2( Alpha-globin transcription factor CP2)ELISA試劑盒
NLN培養(yǎng)基 英文名稱:NLN Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g
3.12-200 ng/mL 山羊痘(GPV)核酸檢測試劑盒
15.6-1000 pg/mL 人白介素29(IL-29)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Carboxypeptidase M
1.56-100 ng/mL 人轉(zhuǎn)錄因子AP-1(Transcription factor AP-1) ELISA試劑盒
1.56-100 umol/L 人α1抗胰(ACT)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Prolactin