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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠胸腺上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1139 |
商品介紹：
名稱 小鼠胸腺上皮細胞 2.組織來源：胸腺組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 小鼠胸腺上皮細胞分離自胸腺組織；胸腺是機體重要的淋巴器官,，其功能與免疫緊密相關(guān),，是T細胞分化、發(fā)育,、成熟的場所,，還可以分泌胸腺激素及激素類物質(zhì)，具有內(nèi)分泌技能的器官,。胸腺上皮細胞和胸腺細胞是胸腺微環(huán)境的重要組成部分,，其外，胸腺上皮細胞組成了胸腺細胞不同發(fā)育階段的三維結(jié)構(gòu),，根據(jù)其在胸腺中位置不同,，可分為皮質(zhì)胸腺上皮細胞和髓質(zhì)胸腺上皮細胞。胸腺細胞的發(fā)育和成熟是通過在胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)上皮細胞的遷移過程中相互作用完成的,。此外,，胸腺細胞通過皮質(zhì)胸腺上皮細胞介導的陽性選擇和髓質(zhì)胸腺上皮細胞介導的陰性選擇發(fā)育為能夠識別和耐受自身主要組織相容復合體和自身抗原的成熟T淋巴細胞。胸腺上皮細胞是構(gòu)成胸腺微環(huán)境的主要成份,，其形態(tài),、分布和功能多樣。表面抗原表達具有高度異質(zhì)性，與胸腺細胞結(jié)合成不同類型復合體,，部分胸腺上皮細胞相互排列構(gòu)成囊泡樣結(jié)構(gòu),。電鏡觀察，可把胸腺上皮細胞分為3-6型,，用抗胸腺上皮細胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細胞分為9種類型,。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠胸腺上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的小鼠胸腺上皮細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M147 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
FYN 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
KLK15 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
FGF17 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
IFNA1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
IFNL2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
IFNL1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
DAPK1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
PIK3CB 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
ROBO4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CD22 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
小鼠胸腺上皮細胞0.156-10 ng/mL 人水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒
皰肉牛肉粒 英文名稱：Dried Meat Particle 產(chǎn)品規(guī)格：100g
0.156-10 ng/mL 人黑色素瘤優(yōu)表達抗原(PRAME)ELISA試劑盒
0.39-25 ng/mL 人谷脫羧(GAD)ELISA試劑盒
醇發(fā)酵管 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Transforming protein RhoA
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Laminin subunit beta-4
MS培養(yǎng)基（不含有機元素，不含瓊脂和蔗糖） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g
強化梭菌瓊脂 英文名稱：Reinforced Clostridium Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
B（1.2mg） 英文名稱：Polymyxin B 產(chǎn)品規(guī)格：1.2mg/支*5
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