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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1095 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
細胞肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移II（CARNITINE PALMITOYL－TRANSFERASE II）活性比色法定量檢測試劑盒 20次
組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移（CARNITINE PALMITOYL－TRANSFERASE）活性比色法定量檢測試劑盒
細胞肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移II（CARNITINE PALMITOYL－TRANSFERASE II）活性比色法定量檢測試劑盒 20次
組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移（CARNITINE PALMITOYL－TRANSFERASE）活性比色法定量檢測試劑盒
詳細介紹
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 角膜成纖維細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1095 |
商品介紹：
名稱 角膜成纖維細胞 2.組織來源：眼角膜組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 人角膜成纖維細胞分離自眼角膜組織,；角膜位于眼球前壁的一層透明膜,，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形,，從前面看為橫橢圓形,。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄,。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛,。為了保持透明,，角膜并沒有血管，透過外界空氣,、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣,。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層,、前彈力層,、基質(zhì)層,、后彈力層、內(nèi)皮細胞層,。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的角膜成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁*,，伸展成梭形,，胞核清晰，分布較均勻,，散在生長,，不聚集成團；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài),，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長,，平坦、胞體較大,，細胞質(zhì)透明,，細胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。角膜成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持角膜的正常形態(tài),，合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。 5.方法簡介： 實驗室分離的人角膜成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的人角膜成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H131 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
CD28 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
CD28 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標(biāo)簽
FVII / F7 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
FVII / F7 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標(biāo)簽
F9 / FIX 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
MYC 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
EZH2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
EZH2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標(biāo)簽
HSPA8 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
CDC25A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標(biāo)簽
角膜成纖維細胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-microseminoprotein
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Transcription factor 21
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Hypoxia-inducible factor 1-alpha
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Uveal autoantigen with coiled-coil domains and ankyrin repeats
葡萄糖銨 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支
0.47-30 ng/mL 人DnaJ同系物亞科B成員3(DNAJB3)ELISA試劑盒
抗生素檢定培養(yǎng)基6號(7.8-8.0) 英文名稱：Antibiotic Agar No.6 產(chǎn)品規(guī)格：250g
39-2500 pg/mL 人殺菌性通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Troponin T, cardiac muscle
0.156-10 ng/mL 人瞬態(tài)電壓感受器陽離子通道亞科V成員1(TrpV1)ELISA試劑盒
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