操作步驟:
1,、準備:從冰箱取出試劑盒,,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2,、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液成原倍的洗滌液,。
3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,,固定于框架上,,分別設(shè)置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,,記錄各孔位置,,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,,再加樣本40μL(即樣本5倍),;空白對照孔不加。
4,、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。
5、洗板:棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板),。
6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,,空白對照孔不加,。
7、溫育:重復(fù)4的操作,。
8,、洗板:重復(fù)5的操作。
9,、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min,。
10,、終止:取出酶標板,,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11,、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值),。
12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值,,計算出標準曲線的直線回歸方程,,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算,。zui終濃度為實際測定濃度乘以倍數(shù)。
注:本公司提供試劑盒免費代測服務(wù),。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員,。
產(chǎn)品全稱:NOL10 核仁蛋白10elisa試劑盒原理
英文名稱:Nucleolar Protein 10(NOL10)ELISA Kit
貨號:GOY-01E11759
規(guī)格:48T/96T
服務(wù):可提供免費代測服務(wù),以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等
保存環(huán)境:2-8℃低溫,、避光,、防潮
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..需要而未提供,。
具有如下優(yōu)點:
一,、高效、靈敏,、特異的抗體,;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,;
三,、吸附性能好,空白值低,,孔底透明度高的固相載體,;
四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型,;
五,、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費,。
試劑和樣本的控制方法:
一,、試劑 1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),我司嚴格按照進行,,已獲得國家承認的“三證",,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,只要客戶提前下單,,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,,值得您選擇,。 2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,,再進行測定,,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,,以滿足后面的測定需求,。 | 二、樣本 1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子,、補體,、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體,、某些自身抗體等,; 類風(fēng)濕因子的控制方法: ①用F(ab)2替代完整的IgG; ②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理,; ③檢測抗原時,可用加入到標本中使RF降解,。 |
試劑配制:
1,、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2,、標準品(Standard):2瓶(凍干品),。
3,、樣品(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4,、標記抗體(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5、辣根過氧化物酶標記親和素 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6,、標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8,、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,,使用時每瓶用蒸餾水25倍,。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4),。
重組 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 標簽)
重組 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽)
重組 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標簽)
重組小鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標簽)
重組 CCL5 / RANTES 蛋白 (His & mucin 標簽)
重組 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77)
重組 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77, Fc 標簽)
重組 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77)
重組 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 標簽)
重組 CXCL4 / PF4 蛋白
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