L2 (大鼠肺泡上皮細胞)的相關*：620-02-05-甲基 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
61281-38-7五味子甲 規(guī)格： 20mg
輔Q10 規(guī)格： 50mg/瓶
6155-35-7鼠李糖 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
桑葉 規(guī)格： 2g
6902-77-8京平;Genipin 規(guī)格： 20mg
578-86-9甘草 規(guī)格： 20mg
24502-78-1乙酰紫草;Ace

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；

3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。

產品屬性：  

商品介紹：

冷凍保存細胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。

實驗報告：

一,、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化,；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二,、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；

2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；

5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；

6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

(SS)免疫試劑盒進口,、組裝

胸腺肽β4(Thymosin β4)免疫試劑盒進口,、分裝

小鼠大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

豬粘蛋白/粘液素2(MUC2)免疫試劑盒進口、組裝

大鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)免疫試劑盒進口,、分裝

鈣網(wǎng)蛋白(CRT)免疫試劑盒進口,、組裝

白細胞調節(jié)素(LR)免疫試劑盒進口、組裝

骨成型蛋白15(BMP-15/GDF-9B)免疫試劑盒進口,、分裝

可溶性CD276分子(sCD276/sB7-H3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

雞α1酸性糖蛋白(OGCHI)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

L2 (大鼠肺泡上皮細胞)250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH7.0   Citrate Buffer,0.5M,pH7.0   常溫保存

25uL 辛標記dUTP溶液 (0.35mM) DIG-11-dUTP -20℃保存

2 ug pHY300 pHY300 低溫運輸,，-20℃保存

戊烷脒素B瓊脂基礎 Pentane Amidines polymyxin B agar base 250g

1瓶 JEG-3/VP16細胞株 JEG-3/VP16 低溫運輸和保存

氧氣指示劑 Oxygen indicator 1.5ml/支*10

0.5mg 化山羊抗親和素 Biotin Goat Anti Avidin Ab -20℃保存