HLE (肝癌細(xì)胞(未分化))的相關(guān)*：GST融合蛋白THROMBIN切試劑盒 10次
GST融合蛋白THROMBIN切*試劑盒 10次
THROMBIN清除處理試劑盒 10次
GST融合蛋白因子10α（FACTOR Xa）切試劑盒 10次
蛋白/抗體標(biāo)記試劑專題
FITC蛋白標(biāo)記試劑盒 3次（200微克/次）

產(chǎn)品屬性： 

商品介紹：

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；

3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；

二、免疫熒光鑒定：

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；

3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；

6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 SIRT4 基因全長(zhǎng)ORF克隆

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 TNIK 基因全長(zhǎng)ORF克隆

HLE (肝癌細(xì)胞(未分化))0.156-10 ng/mL 人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒

62.5-4000 pg/mL 人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mL 日本血吸蟲(chóng)(SJ)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?

15.6-1000 pg/mL 人Myc原癌基因蛋白(MYC)ELISA試劑盒

78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Putative pro-MCH-like protein 1

瓊脂培養(yǎng)基M 英文名稱：Agar medium M (Triple sugar,iron agar) 產(chǎn)品規(guī)格：250g

0.312-20 ng/mL 人線粒體肽還原（GR）ELISA試劑盒

0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 16

31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Peroxisome proliferator-activated receptor delta

78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Serine/threonine-protein kinase mTOR