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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2025-02-20 12:46:02瀏覽次數(shù)：264
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1251 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠心臟干細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1251 |
商品介紹：
名稱 大鼠心臟干細(xì)胞 2.組織來源：心臟組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠心臟干細(xì)胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動(dòng)物身體中最重要的一個(gè)器官,，主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力,，把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成,，左心房,、左心室、右心房,、右心室四個(gè)腔組成,。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通,，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣）,，這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,，而不能倒流。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng),，向器官,、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳,、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等）,，使細(xì)胞維持正常的代謝和功能,。研究發(fā)現(xiàn)，心臟干細(xì)胞是一種多潛能細(xì)胞,，具有再生和克隆能力,，并可分化為心肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞,。體內(nèi)研究顯示,，從心臟中分離出的心臟干細(xì)胞，經(jīng)體外簡(jiǎn)單培養(yǎng),、增殖和標(biāo)記后,，移植到心肌梗死邊緣區(qū)域，心梗血流動(dòng)力學(xué)和心室壁厚度較對(duì)照組明顯改善,，心肌梗死邊緣區(qū)域發(fā)現(xiàn)有標(biāo)記的心肌細(xì)胞,、平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。盡管其新生心肌細(xì)胞較小,，但表達(dá)一些特殊肌蛋白如心臟肌球蛋白重鏈,、α-肌動(dòng)蛋白、α-輔肌動(dòng)蛋白,、連接蛋白等,，證實(shí)了心臟干細(xì)胞對(duì)心肌梗死的修復(fù)作用。干細(xì)胞移植治療是目前心肌梗死和缺血性心臟病細(xì)胞重建的主要方法,，成體干細(xì)胞中的c-kit陽性心臟干細(xì)胞因其來源于心臟，有定向心臟細(xì)胞系分化的趨勢(shì),，體內(nèi)外可以分化成心肌細(xì)胞,、血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞，同時(shí)自體移植不存在免疫排斥反應(yīng)及倫理問題已經(jīng)成為目前研究的熱點(diǎn),。短期內(nèi)獲得治療量的自體心臟干細(xì)胞是這一治療應(yīng)用于臨床的關(guān)鍵所在,。因此，研究一種新的分離培養(yǎng)方法可在短時(shí)期內(nèi)獲得大量純度較高的自體c-kit陽性心臟干細(xì)胞成為目前干細(xì)胞領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)問題之一,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心臟干細(xì)胞采用機(jī)械剪碎組織,、膠原酶分次消化法結(jié)合差速貼壁,、心臟干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心臟干細(xì)胞經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R189 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)長(zhǎng)梭形 傳代特性可傳3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
CD16a / FCGR3A CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
IgG1 Fc CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
CD16a / FCGR3A CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
/ 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
IL13 / ALRH CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
IFN-gamma / IFNG / γ-IFN CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
小鼠 β-NGF / Beta-NGF CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
Thrombopoietin / THPO / TPO CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
小鼠 IL6ST / CD130 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
大鼠心臟干細(xì)胞環(huán)指蛋白215抗體Anti-DRD2 Antibody綠膿假單胞（綠膿桿）多少錢
環(huán)指蛋白187抗體Anti-DRD5 Antibody白色葡萄球說明書
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