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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產品屬性：
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠海馬神經元細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1027 |
商品介紹：
名稱 小鼠海馬神經元細胞 2.組織來源：腦海馬體 3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 小鼠海馬神經元細胞分離自海馬體,；海馬體(Hippocampus)，又名海馬回,、海馬區(qū),、大腦海馬，海馬體主要負責記憶和學習,。海馬神經元細胞是海馬區(qū)的主要細胞組成,，主要功能是參與近期記憶、情緒及內臟功能調節(jié),、是老年性癡呆,、癲癇等疾病的主要病灶之一,。海馬屬于大腦的邊緣系統，在學習,、記憶、情緒反應及神經系統疾病的病理生理變化等方面有重要作用,，而且海馬組織是中樞神經系統內主要的神經干細胞聚集區(qū),，具有高度序化板層結構和神經元相對獨立分布的特點，境界相對清晰,，便于取材,，因此，海馬神經元體外培養(yǎng)模型被廣大基礎醫(yī)學和臨床醫(yī)學研究者當做理想的實驗模型,。海馬神經元細胞培養(yǎng)是研究神經細胞生物學特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型,，其在神經生物學，發(fā)育生物學體外實驗研究中已被廣泛應用,。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠海馬神經元細胞采用胰蛋白酶消化法,、神經元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結合化學試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠海馬神經元細胞經β-Tubulin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含B-27 Supplement,、Penicillin,、Streptomycin等 產品貨號CM-M107 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)神經元細胞樣 傳代特性屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大鼠 CD302 基因全長ORF克隆
大鼠 CD300LG 基因全長ORF克隆
大鼠 CD300E 基因全長ORF克隆
大鼠 CD300A 基因全長ORF克隆
大鼠 CNTN5 基因全長ORF克隆
大鼠 SLC44A1 基因全長ORF克隆
大鼠 F3 基因全長ORF克隆
大鼠 ACE 基因全長ORF克隆
大鼠 NTRK1 基因全長ORF克隆
大鼠 MFI2 基因全長ORF克隆
小鼠海馬神經元細胞0.312-20 ng/mL 人前列腺干細胞抗原（Prostate stem cell antigen）ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 腦膜炎奈瑟菌C群(NM-C)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
78-5000 pg/mL 豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
李斯特氏菌增菌肉湯（LEB） 英文名稱：Listeria Enrichment Broth 產品規(guī)格：250g
TPY肉湯 英文名稱：TPY Broth 產品規(guī)格：250g
0.156-10 nmol/mL 人Myocardin(MYOCD)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Platelet-activating factor
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Major facilitator superfamily domain-containing protein 2A
MRS肉湯 英文名稱：MRS Broth 產品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human T-box transcription factor TBX3
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