詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠視網膜微血管內皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1049 |
商品介紹:
名稱 大鼠視網膜微血管內皮細胞 2.組織來源:視網膜組織 3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 大鼠視網膜微血管內皮細胞分離自視網膜組織,;視網膜居于眼球壁的內層,,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,,兩層間在病理情況下可分開,,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,,由色素上皮細胞組成,,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光,、散熱以及再生和修復等作用,。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層,、視錐,、視桿細胞層、外界膜,、外顆粒層,、外叢狀層、內顆粒層,、內叢狀層,、神經節(jié)細胞層、神經纖維層,、內界膜,。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用,;后部鼻側有一視神經乳頭,。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。第一神經元是視細胞層,,專司感光,,它包括錐細胞和桿細胞,。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,而視錐細胞則在中心凹處最多,。第二層叫雙節(jié)細胞,,約有10到數百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經節(jié)細胞相聯(lián)系,負責聯(lián)絡作用,。第三層叫節(jié)細胞層,,專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,,它貼于眼球的后壁部,,傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,經由視神經到達出口,。視網膜的分辨力是不均勻的,,在黃斑區(qū),其分辨能力*,。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞,,它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用,,在視網膜血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。由于從不同的組織和器官獲得的內皮細胞具有不同的特性,,在腦和視網膜中,,這些內皮細胞具有內屏障的功能,在調節(jié)血管生理狀態(tài),,釋放血管活性物質以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用,,體外分離培養(yǎng)RCEC對研究視網膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義。 5.方法簡介: 實驗室分離的大鼠視網膜微血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法,、最后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的大鼠視網膜微血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%) 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產品貨號CM-R114 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)內皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%,;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些。
圖1
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,,并經過鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,易碎,,取放蓋玻片時動作要輕,;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過大,,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 IL17B 基因全長ORF克隆
大鼠 IL11 基因全長ORF克隆
大鼠 RELT 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFRSF19 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFSF11 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFRSF12A 基因全長ORF克隆
大鼠 CX3CL1 基因全長ORF克隆
大鼠 CD70 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFRSF11A 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFRSF11B 基因全長ORF克隆
大鼠視網膜微血管內皮細胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Basal cell adhesion molecule
鄰單胞菌鑒別瓊脂 英文名稱: 產品規(guī)格:250g
結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA) 英文名稱:VRBG Agar 產品規(guī)格:250g
1.56-100 ng/mL 人Rho關聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2(Rock-2)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Proto-oncogene tyrosine-protein kinase receptor Ret
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Transcriptional activator Myb
沙氏瓊脂平板9cm(2~25℃) 英文名稱: 產品規(guī)格:9cm*10
麥康凱瓊脂2號 英文名稱:Maconkey Agar No.2 產品規(guī)格:250g
NA培養(yǎng)基(含葡萄糖) 英文名稱:NA Medium 產品規(guī)格:250g
0.78-50 ng/mL 人激肽釋放8(KLK-8)ELISA試劑盒