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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1049 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
定量檢測試劑盒
動物組織氫/鉀ATP（H＋/K＋－ATPase）活性比色法 20次
定量檢測試劑盒
細(xì)氫/鉀ATP（H＋/K＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒 20次
酵母氫/鉀ATP（H＋/K＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒 20次
定量檢測試劑盒
動物組織氫/鉀ATP（H＋/K＋－ATPase）活性比色法 20次
定量檢測試劑盒
細(xì)氫/鉀ATP（H＋/K＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒 20次
酵母氫/鉀ATP（H＋/K＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒 20次
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1049 |
商品介紹：
名稱 大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 2.組織來源：視網(wǎng)膜組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織,；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,，是一層透明的薄膜,。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開,，稱為視網(wǎng)膜脫離,。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細(xì)胞組成,，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞,、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用,。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐,、視桿細(xì)胞層,、外界膜、外顆粒層,、外叢狀層,、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層,、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜,。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭,。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個(gè)神經(jīng)元組成,。第一神經(jīng)元是視細(xì)胞層，專司感光,，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞,。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,，而視錐細(xì)胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞,，約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,，專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,，經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口,。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,，在黃斑區(qū),，其分辨能力*。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力,、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,，在視網(wǎng)膜血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義,。由于從不同的組織和器官獲得的內(nèi)皮細(xì)胞具有不同的特性，在腦和視網(wǎng)膜中,，這些內(nèi)皮細(xì)胞具有內(nèi)屏障的功能，在調(diào)節(jié)血管生理狀態(tài),，釋放血管活性物質(zhì)以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用，體外分離培養(yǎng)RCEC對研究視網(wǎng)膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機(jī)制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義,。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、最后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R114 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
圖1
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 IL17B 基因全長ORF克隆
大鼠 IL11 基因全長ORF克隆
大鼠 RELT 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFRSF19 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFSF11 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFRSF12A 基因全長ORF克隆
大鼠 CX3CL1 基因全長ORF克隆
大鼠 CD70 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFRSF11A 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFRSF11B 基因全長ORF克隆
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Basal cell adhesion molecule
鄰單胞菌鑒別瓊脂 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g
結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA) 英文名稱：VRBG Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
1.56-100 ng/mL 人Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2(Rock-2)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Proto-oncogene tyrosine-protein kinase receptor Ret
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Transcriptional activator Myb
沙氏瓊脂平板9cm（2~25℃） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：9cm*10
麥康凱瓊脂2號 英文名稱：Maconkey Agar No.2 產(chǎn)品規(guī)格：250g
NA培養(yǎng)基(含葡萄糖) 英文名稱：NA Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.78-50 ng/mL 人激肽釋放8(KLK-8)ELISA試劑盒
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