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詳細介紹
產品屬性：
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠視網膜微血管內皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1049 |
商品介紹：
名稱 大鼠視網膜微血管內皮細胞 2.組織來源：視網膜組織 3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠視網膜微血管內皮細胞分離自視網膜組織,；視網膜居于眼球壁的內層,，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,，兩層間在病理情況下可分開,，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,，由色素上皮細胞組成,，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光,、散熱以及再生和修復等作用,。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層,、視錐,、視桿細胞層、外界膜,、外顆粒層,、外叢狀層、內顆粒層,、內叢狀層,、神經節(jié)細胞層、神經纖維層,、內界膜,。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用,；后部鼻側有一視神經乳頭,。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。第一神經元是視細胞層,，專司感光,，它包括錐細胞和桿細胞,。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處最多,。第二層叫雙節(jié)細胞,，約有10到數百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡作用,。第三層叫節(jié)細胞層,，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,，它貼于眼球的后壁部,，傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面，經由視神經到達出口,。視網膜的分辨力是不均勻的,，在黃斑區(qū)，其分辨能力*,。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞,，它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用,，在視網膜血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。由于從不同的組織和器官獲得的內皮細胞具有不同的特性,，在腦和視網膜中,，這些內皮細胞具有內屏障的功能，在調節(jié)血管生理狀態(tài),，釋放血管活性物質以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用,，體外分離培養(yǎng)RCEC對研究視網膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠視網膜微血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法,、最后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠視網膜微血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產品貨號CM-R114 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)內皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
圖1
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,，并經過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 IL17B 基因全長ORF克隆
大鼠 IL11 基因全長ORF克隆
大鼠 RELT 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFRSF19 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFSF11 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFRSF12A 基因全長ORF克隆
大鼠 CX3CL1 基因全長ORF克隆
大鼠 CD70 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFRSF11A 基因全長ORF克隆
大鼠 TNFRSF11B 基因全長ORF克隆
大鼠視網膜微血管內皮細胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Basal cell adhesion molecule
鄰單胞菌鑒別瓊脂 英文名稱： 產品規(guī)格：250g
結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA) 英文名稱：VRBG Agar 產品規(guī)格：250g
1.56-100 ng/mL 人Rho關聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2(Rock-2)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Proto-oncogene tyrosine-protein kinase receptor Ret
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Transcriptional activator Myb
沙氏瓊脂平板9cm（2~25℃） 英文名稱： 產品規(guī)格：9cm*10
麥康凱瓊脂2號 英文名稱：Maconkey Agar No.2 產品規(guī)格：250g
NA培養(yǎng)基(含葡萄糖) 英文名稱：NA Medium 產品規(guī)格：250g
0.78-50 ng/mL 人激肽釋放8(KLK-8)ELISA試劑盒
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