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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1329 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白(NE)免疫試劑盒*直銷
小鼠脂氧素A4(LXA4)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝
小鼠脂聯(lián)素(ADP)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝
小鼠脂肪酸合成(FASN)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
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詳細(xì)介紹
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠腦微血管周細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1329 |
商品介紹：
名稱 大鼠腦微血管周細(xì)胞 2.組織來源：大腦組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠腦微血管周細(xì)胞分離自腦微血管；大腦分左右兩個(gè)半球,，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方,。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì),。每一個(gè)半球都有三個(gè)面，即外側(cè)面（約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3）,、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）,；半球表面有很多深淺不等的溝或裂,，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積,；大腦外側(cè)面重要的溝,、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝,。由于三溝裂之界隔,，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉,、顳葉,、枕葉四大部分。周細(xì)胞（pericyte）又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞,，是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞,，可以收縮。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中,，通過物理接觸和旁分泌信號與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊,，監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過程。此外,，周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量,、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用，其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一,，所以對血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征,、標(biāo)記物、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料,。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量,。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個(gè)基膜，基膜上有多種細(xì)胞連接,，包括多種整合素,、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素,。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控,；毛細(xì)血管受損時(shí)，周細(xì)胞還可增殖,，分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞,。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腦微血管周細(xì)胞采用中性蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腦微血管周細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R222 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳3-5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL1R1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL6ST / gp130 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 LAMP2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 REG1A / PSPS 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 XEDAR / EDA2R 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠腦微血管周細(xì)胞一氧化氮合成-2（抗原）Anti-C6 Antibody侖氨西林Lenampicillin
蛇巴曲抗原Anti-CA1 Antibody利福霉素BRifamycin B
一氧化氮合成-3（抗原）Anti-CA12 Antibody6-青霉烷酸6- aminopenicillanic acid
神經(jīng)肽 Y（抗原）Anti-CA12 Antibody鹽酸左Levofloxacin hydrochloride
谷受體（抗原）Anti-CA13 Antibody阿米卡星雜質(zhì)AAmikacin?impurity A
神經(jīng)生長因子-3（抗原）Anti-CA13 Antibody克拉維酸鉀Potassium clavulanate
神經(jīng)生長因子4/5（抗原）Anti-CA13 Antibody鹽酸加替沙星Gatifloxacin hydrochloride
神經(jīng)生長因子（抗原）Anti-CA14 Antibody頭孢孟多酯Cefamandole Nafate
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