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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-19 14:47:51瀏覽次數(shù)：229
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0983 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0983 |
商品介紹：
名稱 冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 2.組織來源：冠狀動(dòng)脈 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自冠狀動(dòng)脈組織,；冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈，起于主動(dòng)脈根部,，分左右兩支,，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,，將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型：右優(yōu)勢型,、均衡型、左優(yōu)勢型,。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的第一對(duì)分支,。左冠狀動(dòng)脈為一短干,，發(fā)自左主動(dòng)脈竇，經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間,，沿冠狀溝向左前方行后,，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合,。冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層扁平分布，是一薄層的專門上皮細(xì)胞,，它形成冠狀動(dòng)脈的內(nèi)壁,，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng),，由心臟直至最小的微血管,。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶短暫消化后組織貼塊、結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H087 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大鼠 TAGLN 基因全長ORF克隆
大鼠 CTSB 基因全長ORF克隆
大鼠 KLK13 基因全長ORF克隆
大鼠 TCP1 基因全長ORF克隆
大鼠 LOC683897 基因全長ORF克隆
大鼠 UGP2 基因全長ORF克隆
大鼠 MTCH2 基因全長ORF克隆
大鼠 MTHFD2 基因全長ORF克隆
大鼠 IMPDH2 基因全長ORF克隆
大鼠 MRPS22 / LOC683519 基因全長ORF克隆
冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞7.8-500 ng/mL ELISA Kit for Human Membrane primary amine oxidase
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Hemopexin
抗生素檢定培養(yǎng)基9號(hào) 英文名稱：Antibiotic Agar NO.9 產(chǎn)品規(guī)格：250g
62.5-4000 nmol/L ELISA Kit for Human Alpha-1B-glycoprotein
GN增菌液 英文名稱：GN Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格：9ml*20支/包
0.156-10 ng/mL 人γ-分泌(γ-secretase/GACE)ELISA試劑盒
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human 60S ribosomal protein L13
胰蛋白胨大豆瓊脂 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：5kg/袋
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Phospholipase A2, membrane associated
0.312-20 ng/mL 人性別決定區(qū)Y框蛋白9(SOX9)ELISA試劑盒
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