產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
小鼠嗅上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1143 |
商品介紹:
名稱 小鼠嗅上皮細(xì)胞 2.組織來源:嗅上皮組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 小鼠嗅上皮細(xì)胞分離自嗅上皮組織,;嗅上皮細(xì)胞是鼻腔的嗅區(qū)黏膜的一種特殊的感覺性上皮細(xì)胞,,嗅上皮細(xì)胞為棱形雙極細(xì)胞,,每個細(xì)胞表面為細(xì)長的嗅毛,,突出于嗅區(qū)黏膜上皮細(xì)胞表面,,而細(xì)胞的另一端為中央突,,常匯成多數(shù)細(xì)微的嗅絲,,組成嗅神經(jīng)通向顱內(nèi),。這些細(xì)胞的特殊結(jié)構(gòu),是嗅覺功能的重要組成部分,。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠嗅上皮細(xì)胞采用膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng),、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測: 實驗室分離的小鼠嗅上皮細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M149 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性屬于高度分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,,95%,;CO2,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,易碎,,取放蓋玻片時動作要輕,;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過大,,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
ABCA1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
TGM3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
IKBKE 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
MUSK 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
MPO 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
MYLK3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
TLR8 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CASK 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
ADAMTS15 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
XPNPEP2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
小鼠嗅上皮細(xì)胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Serine/threonine-protein kinase LMTK3
麥芽汁瓊脂 英文名稱:Malt Extract Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
78-5000 pg/mL 人金屬-β-內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)域蛋白1 (MBLAC1) ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Noradrenaline
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Tacrolimus
RaKa-Ray培養(yǎng)基 英文名稱:Raka-Ray Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
62.5-4000 pg/mL 人肌醇單2(IMPA2)ELISA試劑盒
明膠鹽緩沖液 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g
0.312-20 ng/mL 人激肽釋放6(KLK-6)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 人腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒