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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2025-02-19 21:30:33瀏覽次數(shù)：304
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1029 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 表皮黑色素細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1029 |
商品介紹：
名稱 表皮黑色素細(xì)胞 2.組織來源：皮膚組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人表皮黑色素細(xì)胞分離自皮膚組織；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,，由胚胎時(shí)期外胚層形成,，具有抗摩擦和抗損傷的作用,。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成,。從基底層到表面可分為五層,，即基底層、棘層,、顆粒層,、透明層和角質(zhì)層。黑色素細(xì)胞是皮膚產(chǎn)生和維持色素的主要細(xì)胞,，起源于神經(jīng)嵴,，后逐漸遷移到表皮和毛囊。黑色素細(xì)胞的異?；蚬δ艿氖С?dǎo)致了一系列難治性色素性疾病的發(fā)生,，如、黃褐斑等,。表皮黑色素細(xì)胞主要分布于位于表皮的基底層,，與表皮細(xì)胞共同組成表皮黑素單位，其主要功能是產(chǎn)生黑素小體保護(hù)皮膚免受損害,。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮黑色素細(xì)胞先中性蛋白酶消化,、后胰蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮黑色素細(xì)胞經(jīng)S-100免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H108 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形,、多角形 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大鼠 CD247 基因全長ORF克隆
大鼠 SLC4A1 基因全長ORF克隆
大鼠 TLR4 基因全長ORF克隆
大鼠 FZD9 基因全長ORF克隆
大鼠 ENPEP 基因全長ORF克隆
大鼠 TLR9 基因全長ORF克隆
大鼠 IL1A 基因全長ORF克隆
大鼠 ART1 基因全長ORF克隆
大鼠 ICOS 基因全長ORF克隆
大鼠 CD276 基因全長ORF克隆
表皮黑色素細(xì)胞0.78-50 ng/mL 人凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 人活性氧調(diào)制因子1 (ROS modulator 1)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL 脂氧素B4(Lipoxin B4)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 蠶微粒子病(NB)核酸檢測試劑盒
0.156-10 ng/mL 人源性激肽釋放結(jié)合蛋白 ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL 戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒
劉榮標(biāo)氏鞭毛染色液 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：5ml*8
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Lymphotoxin-alpha
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Cathepsin L2
0.625-40 ng/mL 人磷脂A2受體（PLA2R）ELISA試劑盒
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