產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
卵巢上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0897 |
商品介紹:
名稱 卵巢上皮細(xì)胞 2.組織來源:卵巢組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 人卵巢上皮細(xì)胞分離自卵巢組織,;卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素,。卵巢的位置與睪丸相同,,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),,呈葡萄狀,,均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,卵泡呈黃色,,卵巢表面密布血管,。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢,,但是部分魚類的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu),,而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官,,它的外表有一層上皮組織,,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì),。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,,其中有許多血管,、淋巴管和神經(jīng)。卵巢上皮細(xì)胞主要功能:①上皮細(xì)胞能分泌激素,,刺激卵細(xì)胞分化成熟,;②細(xì)胞能分泌炎癥介質(zhì),參與炎癥反應(yīng),。 5.方法簡(jiǎn)介: 實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè): 實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H055 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,,95%;CO2,,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,,造成細(xì)胞大量死亡,,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些,。
![88.jpg 88.jpg](https://img78.chem17.com/6fd5d5abffebbb9eb8c0dca9a38143fb82e0e616002c0b08ef4b21ae4f928fa17a26fb8bf5fa78d9.jpg)
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過大,,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 SDF2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 BDNF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CystatinC / CST3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 TGFBR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 F11 / FXI 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CST7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 SERPINF1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CLEC7A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CD226 / DNAM-1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 NT5E 基因全長(zhǎng)ORF克隆
卵巢上皮細(xì)胞檢定培養(yǎng)基 英文名稱:Test Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin-25
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Protein S100-P
0.78-50 ng/mL 人原C(PG-C)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人鈣抑制蛋白(CAST)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人泛素蛋白連接E3成分N識(shí)別蛋白1(E3 ubiquitin-protein ligase UBR1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Alpha-galactosidase A
78-5000 pg/mL 侵襲性大腸桿菌(EIEC)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Ectodysplasin-A
綠膿菌素測(cè)定用假單胞菌瓊脂培養(yǎng)基(PAP) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g