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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-24 10:18:54瀏覽次數(shù)：306
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1383 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 前列腺基質(zhì)細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1383 |
商品介紹：
名稱 前列腺基質(zhì)細(xì)胞 2.組織來源：前列腺 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人前列腺基質(zhì)細(xì)胞分離自前列腺組織,；前列腺（Prostate）是雄性*的性腺器官,；前列腺是不成對的實(shí)質(zhì)性器宮，由腺組織和肌組織構(gòu)成,。前列腺如栗子,，底朝上，與膀胱相貼,，尖朝下,，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合,，后面依直腸,。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口,，所以，前列腺有問題時(shí),，排尿首先受影響,。前列腺是機(jī)體非常少有的,，具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺,。作為外分泌腺,，前列腺每天分泌前列腺液,，是構(gòu)成精液主要成分,；作為內(nèi)分泌腺,，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。常見疾病為良性前列腺增生,，在病理學(xué)上良性前列腺增生癥又稱前列腺結(jié)節(jié)狀增生,，是前列腺中最常見的產(chǎn)生癥狀的瘤樣病變，結(jié)節(jié)開始發(fā)生可能是基質(zhì)細(xì)胞自發(fā)逆轉(zhuǎn)至胚胎階段，其生長潛力可能是基質(zhì)-上皮之間的相互協(xié)同作用所致,，最終形成前列腺增生,。基質(zhì)細(xì)胞是器官中結(jié)締組織細(xì)胞,，起到為器官中實(shí)質(zhì)細(xì)胞提供支持和營養(yǎng)的作用,，成纖維細(xì)胞,、炎癥細(xì)胞、免疫細(xì)胞以及周皮細(xì)胞都是常見的基質(zhì)細(xì)胞類型,。基質(zhì)細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的相互作用在腫瘤細(xì)胞的生長過程中具有重要作用,。體外培養(yǎng)人前列腺基質(zhì)細(xì)胞對治療前列腺增生有重要的研究意義,。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人前列腺基質(zhì)細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的人前列腺基質(zhì)細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件貼壁不包被 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H244 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 alpha-Galactosidase A / GLA 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 Cystatin 7 / CST7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 TNFRSF11A 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 WIF1 / WIF-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CST9L / Testatin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
GPX7 / Glutathione Peroxidase 7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
IFITM3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ADM / Adrenomedullin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
前列腺基質(zhì)細(xì)胞葡萄糖酸內(nèi)酯抗體Anti-CD19 Antibody(原貨號(hào)PB0404)雙?？虏CR檢測試劑盒說明書
蛋白2C亞型α抗體Anti-CD1D Antibody乙型脊髓灰質(zhì)炎病PCR檢測試劑盒說明書
蛋白激C nu型抗體Anti-CD1A Antibody人Nucleostemin基因PCR檢測試劑盒品牌
化蛋白激C nu型抗體Anti-CD1C Antibody犬布氏桿PCR檢測試劑盒說明書
化磷脂酰肌激3催化亞單位3抗體Anti-CD1A Antibody偽狂犬病PCR檢測試劑盒說明書
甘油酸脫氫抗體Anti-CD19 Antibody豬細(xì)小病PCR檢測試劑盒品牌
化泌乳素抗體Anti-CD1D Antibody病H9亞型PCR檢測試劑盒多少錢
半胱天冬-3原抗體Anti-CD2 Antibody腺病PCR檢測試劑盒規(guī)格
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