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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-24 14:18:58瀏覽次數(shù)：242
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1413 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠陰莖白膜成纖維細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1413 |
商品介紹：
名稱 大鼠陰莖白膜成纖維細(xì)胞 2.組織來(lái)源： 陰莖白膜組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠陰莖白膜成纖維細(xì)胞分離自陰莖白膜組織,；海綿體,，又稱海綿體肌,，是最硬的平滑肌和結(jié)締組織,。海綿體是一種勃起組織，外面包有堅(jiān)厚的白膜,，內(nèi)部由結(jié)締組織和平滑肌組成海綿狀支架,，其腔隙與血管相通,。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的陰莖白膜成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,，其中部分開(kāi)始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁*,，伸展成梭形,，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng),，不聚集成團(tuán),；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài),，細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦,、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。陰莖白膜成纖維細(xì)胞（PLFs）作為牙周膜的主體細(xì)胞,，是牙周膜主要的間質(zhì)細(xì)胞,，它不僅具有合成膠原、基質(zhì),、彈力纖維和糖蛋白的功能,，還有吸收膠原吞噬異物的能力，還參與了牙周組織的病變,、修復(fù)及再生過(guò)程?，F(xiàn)在，利用牙周膜細(xì)胞建立體外模型,，已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段,。 本公司的大鼠陰莖白膜成纖維細(xì)胞采用膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶,；細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 5.培養(yǎng)基信息： DMEM[H],、FBS,、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
GPR56 / TM7LN4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
RET Kinase 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 AGRP / AgRP 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CD93 / C1QR1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 CD59a / MAC-IP 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 CD79B / B29 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 LRIG1 / LIG-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 CD33 / Siglec-3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CD93 / C1QR1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠陰莖白膜成纖維細(xì)胞白凡士林 醫(yī)用級(jí)5-羧基熒光素琥珀酰亞酯 90%Anti-DDB2/FITC 熒光素標(biāo)記損傷DNA結(jié)合蛋白2抗體IgG
黃凡士林 醫(yī)用級(jí)5(6)-羧基熒光素 95%Anti-DDC/FITC 熒光素標(biāo)記多巴脫羧抗體IgG
氫加蘭他敏 98%5(6)-羧基熒光素琥珀酰亞酯 96%Anti-DEC-205/CD205/Ly75/FITC 熒光素標(biāo)記CD205抗體IgG
2,2,6-基-4H-1,3-二噁英-4-酮 90%6-羧基熒光素琥珀酰亞酯 90%Anti-Dectin-1/CLECSF12/FITC 熒光素標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族7成員A抗體IgG
Amberlite? IR-120陽(yáng)離子交換樹(shù)脂 鈉型6-羧基四甲基羅丹明 for fluorescence, ≥90%Anti-Dectin-2/CLECSF10/CLEC6A/FITC 熒光素標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族6成員A抗體IgG
Amberlyst® 15離子交換樹(shù)脂 濕6-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞酯 for fluorescenceAnti-Dectin-1/CLECSF12/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族7成員A抗體IgG
Amberlite® XAD16非離子型大孔樹(shù)脂 20-60 mesh4,’6-二脒基-2-苯基 98%Anti-DDX4/MVH/FITC 熒光素標(biāo)記DDX4抗體IgG
Amberlite XAD7HP 離子交換樹(shù)脂 Mesh 20-60二氫羅丹明123 95%Anti-Defensin Beta1/FITC 熒光素標(biāo)記防御素β1抗體IgG
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