化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 小鼠胰腺腺泡細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1335 |
商品介紹：
名稱 小鼠胰腺腺泡細(xì)胞 2.組織來(lái)源：胰腺組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 小鼠胰腺腺泡細(xì)胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分,。外分泌腺由腺泡和腺管組成,，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道,。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶原,、脂肪酶,、淀粉酶等。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸,，有消化蛋白質(zhì),、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞,、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞,。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,，升高血糖；β細(xì)胞分泌胰島素,，降低血糖,；γ細(xì)胞分泌生長(zhǎng)抑素，以旁分泌的方式抑制α,、β細(xì)胞的分泌,；PP細(xì)胞分泌胰多肽，抑制胃腸運(yùn)動(dòng),、胰液分泌和膽囊收縮,。胰腺泡主要由錐體形的腺泡細(xì)胞組成,，與閏管相連，外有基膜,，為典型的蛋白質(zhì)分泌細(xì)胞,。胰腺泡可分泌多種消化酶，如胰蛋白酶原,、胰糜蛋白酶原,、胰淀粉酶、胰脂肪酶,、DNA 酶和RNA 酶等,，分別消化食物中的營(yíng)養(yǎng)成分 ；胰腺泡也分泌胰蛋白酶抑制因子,，防止兩種蛋白酶原被激活,，腺泡腔內(nèi)有泡心細(xì)胞，扁平或立方形,，色淺,，是閏管起始部的上皮細(xì)胞，為胰腺腺泡的特點(diǎn),。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胰腺腺泡細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胰腺腺泡細(xì)胞經(jīng)亞甲基藍(lán)染色檢測(cè),，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M226 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性懸浮 細(xì)胞形態(tài)圓形 傳代特性不增殖；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
食蟹猴 CD200 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 Epcr / PROCR 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 DDR2 Kinase 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 CD160 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 RBP4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 PDGFRB / PDGFR-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 CTLA4 / CD152 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 BTC / Betacellulin 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 HepaCAM2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠胰腺腺泡細(xì)胞MUGal肉湯 BR甘 用于分子生物學(xué), ≥99.0% (NTHuman anti-Mi2-antibody ELISA Kit 人抗Mi2抗體
改良E.C新生霉素增菌肉湯基礎(chǔ) BRL-組 99%Human anti-Ku-antibody ELISA Kit 人抗Ku抗體
MFC培養(yǎng)基 BRL-賴 98%Human anti-IgA antibody ELISA Kit 人抗IgA抗體
甘露發(fā)酵培養(yǎng)基 BR變色酸2R ARANNA-1/Hu(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體
甘露瓊脂培養(yǎng)基 BR羅丹寧 用于光譜測(cè)定沒(méi)食子酸,，≥99.0% (HPLC)anti-DNase B(Human anti-deoxyribonuclease B) ELISA Kit 人抗DNAB抗體
半固體瓊脂 BR酸鋅 Anhydrous BP180-Ab(Human anti-Bullous Pemphigoid 180 antibody) ELISA Kit 人抗BP180抗體
李氏菌選擇性培養(yǎng)基 BR1-芐基哌 97%BB-Ab(Human anti-B burgdorleri antibody) ELISA Kit 人抗BB抗體
動(dòng)力－硝酸鹽培養(yǎng)基（A法） BR2,2'-雙(三氟甲基)二聯(lián)苯 98.0%ASMA(Human Anti-smooth muscle antibody) ELISA Kit 人抗平滑肌抗體
化工儀器網(wǎng)