詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
前列腺成纖維細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0773 |
商品介紹:
名稱 前列腺成纖維細胞 2.組織來源:前列腺 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 人前列腺成纖維細胞分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性*的性腺器官,;前列腺是不成對的實質(zhì)性器宮,,由腺組織和肌組織構(gòu)成,。前列腺如栗子,,底朝上,,與膀胱相貼,,尖朝下,,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,,后面依直腸,。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,,所以,,前列腺有問題時,排尿首先受影響,。前列腺是機體非常少有的,,具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺,。作為外分泌腺,,前列腺每天分泌前列腺液,,是構(gòu)成精液主要成分;作為內(nèi)分泌腺,,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素",。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,。成纖維細胞較大,,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,,細胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的前列腺成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細胞基本貼壁*,,伸展成梭形,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長,不聚集成團,;細胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,,平坦、胞體較大,,細胞質(zhì)透明,,細胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。 5.方法簡介: 實驗室分離的人前列腺成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 實驗室分離的人前列腺成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H022 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,,95%,;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過大,,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Galectin-4 基因全長ORF克隆
Galectin-1 基因全長ORF克隆
Galectin-3 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆
Pleiotrophin / PTN 基因全長ORF克隆
Prostasin / Prss8 基因全長ORF克隆
NTF3 / NT-3 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆
PCSK7 基因全長ORF克隆
Matriptase / ST14 基因全長ORF克隆
Pin1 基因全長ORF克隆
PDGF-D 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆
前列腺成纖維細胞0.312-20 ng/mL 人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人原纖維蛋白3(Fibrillin-3)ELISA試劑盒
0.625-40 ng/mL 人上皮細胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人骨骼型蘭尼定受體1(RYR1)ELISA試劑盒
胰胨瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g
0.156-10 ng/mL 人纖維膠凝蛋白3(FCN3)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Secretin
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Vascular endothelial growth factor receptor 2
消毒液中和肉湯 英文名稱:Disinfectant Neutralization Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Runt-related transcription factor 2