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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2025-02-19 11:42:03瀏覽次數(shù)：306
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0801 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 外周血白細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0801 |
商品介紹：
名稱 外周血白細(xì)胞 2.組織來源：外周血 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人外周血白細(xì)胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液,，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念,。白細(xì)胞（Leukocyte），舊稱白血球,，血液中的一類細(xì)胞,。根據(jù)白細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無特殊顆粒，可將其分為有粒白細(xì)胞和無粒白細(xì)胞,。前者常簡稱為粒細(xì)胞,，根據(jù)其特殊顆粒的染色特性，又分為中性粒細(xì)胞,、嗜堿性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞,，白細(xì)胞也通常被稱為免疫細(xì)胞。在顯微鏡下可以看到,，血細(xì)胞中體積比較大,、數(shù)量比較少，具有細(xì)胞核,；其主要作用是吞噬細(xì)菌,、防御疾病。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血白細(xì)胞采用取外周血,、通過密度梯度離心法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血白細(xì)胞經(jīng)過檢測,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H030 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細(xì)胞形態(tài)圓形 傳代特性不增殖,；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 TIMM23 基因全長ORF克隆
小鼠 RPL11 基因全長ORF克隆
小鼠 EMC4 基因全長ORF克隆
小鼠 SMPX 基因全長ORF克隆
小鼠 RCAN1 基因全長ORF克隆
小鼠 PRMT2 基因全長ORF克隆
小鼠 ATP6AP2 基因全長ORF克隆
小鼠 JAKMIP1 基因全長ORF克隆
小鼠 DCTN4 基因全長ORF克隆
小鼠 DYNC1I1 基因全長ORF克隆
外周血白細(xì)胞15.6-1000 pg/mL 鵝特定基因序列(Goose)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Parathyroid hormone-related protein
0.78-50 ng/mL 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒
6.25-400 ng/mL ELISA Kit for Hyaluronic acid
1.56-100 nmol/L 人結(jié)腸癌病灶轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1(MACC1)ELISA試劑盒
游離生物素測定培養(yǎng)基 英文名稱：Free Biotin Assay Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Inhibin beta B chain
0.78-50 ng/mL 人組織蛋白K(cath-K)ELISA試劑盒
MRS瓊脂平板（9cm） 英文名稱：MRS Agar 產(chǎn)品規(guī)格：10個/包
乙酰胺瓊脂 英文名稱：Acetamide Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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