詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
兔骨髓間充質(zhì)干細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0713 |
商品介紹:
名稱 兔骨髓間充質(zhì)干細胞 2.組織來源:骨髓 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 兔骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSC)分離自骨髓,;骨髓是機體的造血組織,,位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌,、病毒等,;某些淋巴細胞能抗體。因此,,骨髓不但是造血器官,,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨,、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,,稱為紅骨髓,。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,,隨著年齡增大,,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細胞是一種除造血干細胞以外的,、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,,可以向骨、軟骨,、肌組織,、皮膚、脂肪,、神經(jīng)等多種組織分化,,因此可以作為組織工程中的種子細胞,。在骨髓中,BMSC占骨髓有核細胞總數(shù)的0.001%-0.1%,,含量極低,。骨髓間充質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過程中,,受貼壁時間,、種植密度、血清含量,、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響,。 5.方法簡介: 實驗室分離的兔骨髓間充質(zhì)干細胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心,、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 實驗室分離的兔骨髓間充質(zhì)干細胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-Rb007 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,,95%,;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),,懸浮細胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,取放蓋玻片時動作要輕,;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
PVRL3 / PRR3 基因全長ORF克隆
KYNU / Kynureninase 基因全長ORF克隆
CD163 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆
Lyn Kinase 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆
LRRTM3 基因全長ORF克隆
FGFR2 基因全長ORF克隆
BMP-10 基因全長ORF克隆
CR2 / CD21 基因全長ORF克隆
Desmocollin-2 基因全長ORF克隆
Uteroglobin / SCGB1A1 基因全長ORF克隆
兔骨髓間充質(zhì)干細胞胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基(TSB) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250ml*20瓶
0.156-10 ng/mL 人低氧誘導因子1β(HIF-1β)ELISA試劑盒
m-TGE肉湯 英文名稱:m-TGE Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Late cornified envelope protein 3D
0.312-20 ng/mL 人分選微管連接蛋白9(Sorting nexin-9)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Cathepsin F
0.625-40 ng/mL 人多藥耐藥蛋白1(MDR1)ELISA試劑盒
氧化試紙片 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:10片
0.156-10 ng/mL 人重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒
1.56-100 U/L ELISA Kit for Human Thyroid hormone receptor alpha