操作步驟:
1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2,、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液成原倍的洗滌液。
3,、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔,、待測樣本孔和空白對照孔,,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本40μL(即樣本5倍),;空白對照孔不加,。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。
5,、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。
6,、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,,空白對照孔不加。
7,、溫育:重復(fù)4的操作,。
8、洗板:重復(fù)5的操作,。
9,、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min,。
10,、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11、測定:以空白孔調(diào)零,,在終止后15分鐘內(nèi),,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12,、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值,,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,,在回歸方程上計(jì)算出對應(yīng)的樣品濃度,,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算。zui終濃度為實(shí)際測定濃度乘以倍數(shù),。
注:本公司提供試劑盒免費(fèi)代測服務(wù),。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。
產(chǎn)品全稱:FOXO3 叉頭框蛋白O3elisa基本步驟
英文名稱:Forkhead Box Protein O3(FOXO3)ELISA Kit
貨號:GOY-01E12523
規(guī)格:48T/96T
服務(wù):可提供免費(fèi)代測服務(wù),,以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等
保存環(huán)境:2-8℃低溫,、避光、防潮
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一,、高效,、靈敏、特異的抗體,;
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,;
三、吸附性能好,,空白值低,,孔底透明度高的固相載體;
四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五,、性價(jià)比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi),。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑 1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),,我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,,已獲得國家承認(rèn)的“三證",每一個(gè)產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,,不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑,。我司的試劑,值得您選擇,。 2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,,在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測定,,使試劑盒在使用前與室溫平衡,,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測定需求,。 | 二,、樣本 1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體,、高濃度的非特異免疫球蛋白,、異嗜性抗體、某些自身抗體等,; 類風(fēng)濕因子的控制方法: ①用F(ab)2替代完整的IgG,; ②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理; ③檢測抗原時(shí),,可用加入到標(biāo)本中使RF降解,。 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔),。
2,、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3,、樣品(Sample Diluent):1×20ml/瓶,。
4、標(biāo)記抗體(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6,、標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9,、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水25倍,。
10,、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
豬內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝
小鼠生長激素(GH)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝
小鼠補(bǔ)體蛋白5(C5)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
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FOXO3 叉頭框蛋白O3elisa基本步驟HHV8/ORF50 人類皰疹毒8抗體 規(guī)格: 0.2ml
SMARCA4/SNF2 beta/BRG1 抑基因SNF2β抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-Goat IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 2ml
phospho-p107(Thr369) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體 規(guī)格: 0.1ml
Proteasome 20S beta 6 蛋白體PSMβ6抗體 規(guī)格: 0.2ml
Selenoprotein W 蛋白W抗體 規(guī)格: 0.1ml
Tumstatin/COL4A3 瘤抑素抗體 規(guī)格: 0.2ml
RNF186 環(huán)指蛋白186抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 規(guī)格: 0.1ml
CD68 CD68抗體 規(guī)格: 0.1ml