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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-13 10:07:46瀏覽次數(shù)：305
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0775 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0775 |
商品介紹：
名稱 大鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞 2.組織來源：甲狀腺組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞分離自甲狀腺組織；甲狀腺是脊椎動(dòng)物非常重要的腺體,，屬于內(nèi)分泌器官,。在哺乳動(dòng)物身體中，它位于頸部甲狀軟骨下方,，氣管兩旁,。甲狀腺表面有結(jié)締組織被膜，表面結(jié)締組織深入到腺實(shí)質(zhì),，將實(shí)質(zhì)分為許多不明顯的小葉，小葉內(nèi)有很多甲狀腺濾泡和濾泡旁細(xì)胞,。甲狀腺控制使用能量的速度,、蛋白質(zhì),、調(diào)節(jié)機(jī)體對(duì)其他賀爾蒙的敏感性。甲狀腺依靠甲狀腺素來調(diào)整這些反應(yīng),，有T3和T4,。這兩者調(diào)控代謝、生長(zhǎng)速率還有調(diào)解其他的身體系統(tǒng),。T3和T4由碘和酪胺酸合成,。甲狀腺也降鈣素,，調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣的平衡,。其中，甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞（也稱為濾泡細(xì)胞或主要細(xì)胞）是在甲狀腺細(xì)胞是負(fù)責(zé)和分泌甲狀腺激素,，甲狀腺素（T4）和三碘甲狀腺原氨酸（T3）,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞經(jīng)TG（甲狀腺球蛋白）免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R022 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
NOG / Noggin 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MMP-12 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NTF4 / NT-4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NOV / CCN3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NDP / EVR2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FGF9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FCER2 / CD23 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FCGR2B / CD32b 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FCGR2B / CD32b 轉(zhuǎn)錄變體3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
NTN4 / Netrin-4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞改良馬丁培養(yǎng)基顆粒 英文名稱：Martin Medium, Modified 產(chǎn)品規(guī)格：300ml/袋*10
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ficolin-3
mEC肉湯 英文名稱：mE.Coli Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
幽門螺旋桿菌培養(yǎng)基（液體） 英文名稱：Helicobacter Pylori Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL 人程序性死亡蛋白1 ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)因子1(ERCC1)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 人泛素樣蛋白ISG15(Ubiquitin-like protein ISG15)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Galactoside-binding soluble lectin 13
YSG培養(yǎng)基基礎(chǔ)（日本標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Mothers against decapentaplegic homolog 3
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