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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 小鼠脂肪細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1285 |
商品介紹：
名稱 小鼠脂肪細(xì)胞 2.組織來源：脂肪組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 小鼠脂肪細(xì)胞分離自脂肪組織,；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成，聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉,；貯存的脂肪,，在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸,，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性,、血壓水平,、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng),，參與多種重要病理生理過程,；脂肪組織已由過去單純作為能量?jī)?chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪細(xì)胞分為白色脂肪細(xì)胞和褐色（棕色）脂肪細(xì)胞,，常呈白色,，在嬰幼兒期大量增殖，到青春期數(shù)量達(dá)到,，此后數(shù)量一般不再增加,。細(xì)胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡，稱為脂質(zhì)泡,，富含光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),。此外，還有一種褐色脂肪細(xì)胞,，在動(dòng)物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間,、頸背部、腋窩,、縱隔及腎臟周圍,，含有高度團(tuán)縮的褐色脂肪,，作用是將脂質(zhì)分解產(chǎn)熱,，調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)比例。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脂肪細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脂肪細(xì)胞經(jīng)油紅O染色檢測(cè),，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M203 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性屬于終末分化細(xì)胞,；屬于不增殖細(xì)胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
RhoA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
DAPK1 / DAP Kinase 1 (aa 1-363) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
PDK-1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
STK4 / MST1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
CAMKV 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
IL-3 / Interleukin-3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
PDE9A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
RSK3 / RPS6KA2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
小鼠脂肪細(xì)胞Anti-phospho-Smad2(p-Ser465) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠,、牛，馬,，犬,，雞化Smad2抗體IgG
Anti-Phospho-Smad2 (Ser465/467)/FITC 熒光素標(biāo)記化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體IgG
Anti-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)/FITC 熒光素標(biāo)記化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體IgG
Anti-Phospho-Smad3 (Ser423/425) /FITC 熒光素標(biāo)記化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體IgG
Anti-Smad4/FITC 熒光素標(biāo)記Smad4抗體IgG
Anti-Smad7/FITC 熒光素標(biāo)記Smad 7抗體IgG
Anti-SMC1/FITC 熒光素標(biāo)記染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)１抗體IgG
Anti-Phospho-SMC1 (Ser360) /FITC 熒光素標(biāo)記化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)１抗體IgG
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