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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2025-02-18 21:07:51瀏覽次數(shù)：290
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0971 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0971 |
商品介紹：
名稱 大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 2.組織來源：冠狀動(dòng)脈 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自冠狀動(dòng)脈組織；冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈,，起于主動(dòng)脈根部,，分左右兩支，行于心臟表面,。采用Schlesinger等的分類原則,，將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型：右優(yōu)勢(shì)型、均衡型,、左優(yōu)勢(shì)型,。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的第一對(duì)分支。左冠狀動(dòng)脈為一短干,，發(fā)自左主動(dòng)脈竇,，經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后,，立即分為前室間支和旋支,。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合,。冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層扁平分布,，是一薄層的專門上皮細(xì)胞，它形成冠狀動(dòng)脈的內(nèi)壁,，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口,。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至最小的微血管。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶短暫消化后組織貼塊,、結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R081 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 MKRN2 基因全長ORF克隆
大鼠 CCT3 基因全長ORF克隆
大鼠 LDHA 基因全長ORF克隆
大鼠 PGK1 基因全長ORF克隆
大鼠 ADK 基因全長ORF克隆
大鼠 YWHAH 基因全長ORF克隆
大鼠 TECR 基因全長ORF克隆
大鼠 APMAP 基因全長ORF克隆
大鼠 SRSF3 基因全長ORF克隆
大鼠 BPGM 基因全長ORF克隆
大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基B（EP標(biāo)準(zhǔn)） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL 病毒H5N1亞型(AIV-H5N1)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.312-20 ng/mL 人β-防御素14(β-DF14)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人西梅脫寡肽(Thimet oligopeptidase)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ryanodine receptor 1
15.6-1000 pg/mL 人腺苷酸環(huán)化10(ADCY10)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Myeloperoxidase
15.6-1000 pg/mL 生物蝶呤(biopterin)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人Toll樣受體5(TLR5)ELISA試劑盒
胰蛋白胨水培養(yǎng)基 英文名稱：Trytone Water medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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