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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠前列腺成纖維細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1219 |
商品介紹：
名稱 大鼠前列腺成纖維細胞 2.組織來源：前列腺 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠前列腺成纖維細胞分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性*的性腺器官,；前列腺是不成對的實質(zhì)性器宮,，由腺組織和肌組織構(gòu)成,。前列腺如栗子,，底朝上，與膀胱相貼,，尖朝下,，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合,，后面依直腸,。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口,，所以，前列腺有問題時,，排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的,，具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺,。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液,，是構(gòu)成精液主要成分,；作為內(nèi)分泌腺,，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素",。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,。成纖維細胞較大，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,，在一定條件下,，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的前列腺成纖維細胞呈圓形、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁*,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長,，不聚集成團；細胞生長迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長，平坦,、胞體較大，細胞質(zhì)透明,，細胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠前列腺成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠前列腺成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R177 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 / Glycoprotein 120 ELISA配對抗體
Carbonic Anhydrase XIV / CA14 ELISA配對抗體
B4GALT1 / GGTB2 ELISA配對抗體
TREM-2 / TREM2 ELISA配對抗體
CCN3 / NOV / IGFBP9 ELISA配對抗體
CD208 / DC-LAMP / LAMP3 ELISA配對抗體
CD112 / Nectin-2 / PVRL2 ELISA配對抗體
SCARB3 ELISA配對抗體
BMP-2 ELISA配對抗體
TIM-3 / HAVCR2 / TIMD3 ELISA配對抗體
大鼠前列腺成纖維細胞Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462)/FITC 熒光素標記化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體IgG
Anti-VTG/HRP 辣根過氧化物標記兔抗魚,、青鳉魚卵黃蛋白原抗體IgG
Anti-Tumstatin/Col4a3/FITC 熒光素標記腫瘤抑素抗體IgG
Anti-TWIST protein/FITC 熒光素標記TWIST轉(zhuǎn)錄因子蛋白抗體IgG
Rabbit Anti-human Fibrinogen/HRP 辣根過氧化物標記可溶性纖抗體IgG
Rabbit Anti-human Fibrinogen/FITC 熒光素標記纖IgG
Goat Anti-human Fibrinogen/HRP 辣根過氧化物標記羊抗人纖
Anti-TY3H/FITC (Tyrosine Hydroxylase ) 熒光素標記羥化抗體IgG
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