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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-13 09:36:36瀏覽次數(shù)：219
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0751 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠胰腺星狀細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0751 |
商品介紹：
名稱 大鼠胰腺星狀細(xì)胞 2.組織來源：胰腺組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠胰腺星狀細(xì)胞分離自胰腺組織,；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,，腺泡分泌胰液,，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉,、胰蛋白酶原,、脂肪酶,、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,，有消化蛋白質(zhì),、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞,、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞,。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,，升高血糖；β細(xì)胞分泌胰島素,，降低血糖,；γ細(xì)胞分泌生長(zhǎng)抑素，以旁分泌的方式抑制α,、β細(xì)胞的分泌,；PP細(xì)胞分泌胰多肽，抑制胃腸運(yùn)動(dòng),、胰液分泌和膽囊收縮,。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星狀細(xì)胞（PSC）是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細(xì)胞,，PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提,。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴，并表達(dá)Desmin蛋白,，活化后的PSC則表達(dá)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（alpha-SMA）,。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種，并分別具有特異的標(biāo)志物,。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的脂滴可以被油紅O染成紅色,，陽性表達(dá)Desmin。激活狀態(tài)PSC陽性表達(dá)alpha-SMA,。油紅O染色發(fā)現(xiàn),，原代分離的細(xì)胞培養(yǎng)6d，胞漿中仍可見明顯的脂滴,，傳代后,，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示,，細(xì)胞接種24h仍然表達(dá)Desmin,，48h后Desmin基本不再表達(dá)。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細(xì)胞開始表達(dá)alpha-SMA,，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增長(zhǎng)和傳代次數(shù)的增加,，細(xì)胞表達(dá)alpha-SMA,，而不再表達(dá)Desmin，說明細(xì)胞活化,。提示PSC接種24h后即啟動(dòng)了激活過程,，至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細(xì)胞激活，傳代后細(xì)胞處于高度激活狀態(tài),。原代胰腺星狀細(xì)胞可作為慢性胰腺炎新藥的細(xì)胞篩選模型,，目前研究發(fā)現(xiàn)：胰腺受損時(shí)，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細(xì)胞活化,，導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài),、功能發(fā)生變化，促使基質(zhì)增生,、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胰腺星狀細(xì)胞采用膠原酶制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胰腺星狀細(xì)胞經(jīng)α-SMA,、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R016 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
KNG1 / BDK 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PAPPA2 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD208 基因全長(zhǎng)ORF克隆
LBP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RPGR 轉(zhuǎn)錄變體A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
Semaphorin 3E 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SPG3A 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SPG21 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SSSCA1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
FANCL 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠胰腺星狀細(xì)胞0.156-10 ng/mL 人腸血管活性肽受體2 ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Type III iodothyronine deiodinase
0.156-10 ng/mL 人生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6(GAS-6)ELISA試劑盒
麥康凱瓊脂（含結(jié)晶紫） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 2
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Very low-density lipoprotein receptor
豬膽粉 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g
78-5000 pg/mL 人卵固蛋白同族物2(Ovostatin homolog 2)ELISA試劑盒
BBL瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：BBL Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
腸道菌增菌肉湯（EE） 英文名稱：Enterobacteria Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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