產(chǎn)品屬性:
商品介紹:
名稱 臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 2.組織來(lái)源:臍帶組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自臍帶組織;它是臍動(dòng)脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一,,在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用,。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu),,臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈,。在子宮中,,子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管,與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近,,在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2,,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤,,臍靜脈將O2和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒,。 5.方法簡(jiǎn)介: 實(shí)驗(yàn)室分離的人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè): 實(shí)驗(yàn)室分離的人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%) 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H083 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,,95%,;CO2,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),, 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,易碎,,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過(guò)大,,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 CTSL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 RAB8A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 ANXA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 MRPL49 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 PDIA6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 CLDN4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 CNPPD1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 PLRG1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 TIMM22 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 ARPC1B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞0.156-10 ng/mL 人蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)因子1(RGS1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人CD138分子(CD138)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Nucleobindin-2
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 9
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Methylenetetrahydrofolate reductase
0.156-10 ng/mL 人蛋白激活受體2(PAR-2)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL 人腺苷脫氨域包含蛋白1(ADAD1)ELISA試劑盒
7.8-500 pg/mL 人脂肪酸合(FASN)ELISA試劑盒
D/E中和瓊脂 英文名稱:D/E Neutralizing Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
312-20000 pg/mL 人基質(zhì)金屬蛋白11(MMP11)ELISA試劑盒