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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-19 16:01:32瀏覽次數(shù)：285
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1031 | 應用領域 | 化工 |
| 主要用途 | 產品僅供科研使用 |
產品屬性：
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠腦微血管內皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1031 |
商品介紹：
名稱 大鼠腦微血管內皮細胞 2.組織來源：腦組織 3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠腦微血管內皮細胞分離自腦組織,；腦微血管內皮細胞是血腦屏障的主要組成成分，它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,，能夠限制可溶性物質和細胞等從血液進入大腦，大腦微血管內皮細胞與外周內皮細胞相比具有一些相同特性,。它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力,、調節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,，在腦血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。與外周內皮細胞相同,，大腦微血管內皮細胞表面表達細胞粘附分子,，調控白細胞進入大腦。由于微血管內皮細胞的器官特異性,，內皮細胞通常取源于疾病研究的相關組織,。其主要特征如下：①腦微血管內皮細胞存在許多細胞間緊密連接，產生很高的跨內皮阻抗,，延遲細胞旁的通量,；②腦微血管內皮細胞缺乏內皮細胞的窗孔結構，其液相物質胞飲水平較低,；③腦微血管內皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導轉運系統(tǒng),，從而產生“兩極分化"的表現(xiàn)型。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠腦微血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法,、最后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠腦微血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R108 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)內皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5,、PBS沖洗細胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大鼠 IFITM1 基因全長ORF克隆
大鼠 GGT1 基因全長ORF克隆
大鼠 MSR1 基因全長ORF克隆
大鼠 CCR8 基因全長ORF克隆
大鼠 CCR7 基因全長ORF克隆
大鼠 CCR6 基因全長ORF克隆
大鼠 CCR5 基因全長ORF克隆
大鼠 CCR4 基因全長ORF克隆
大鼠 CCR1 基因全長ORF克隆
大鼠 CD164 基因全長ORF克隆
大鼠腦微血管內皮細胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human DNA topoisomerase 2-beta
蔗糖胰蛋白胨肉湯 英文名稱：Sucrose Tryptone Broth 產品規(guī)格：200
0.156-10 ng/mL 人細胞角蛋白19(KRT-19)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Matrix metalloproteinase-17
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Protein delta homolog 1
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Leptin receptor
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Serine--pyruvate aminotransferase
0.39-25 ng/mL ELISA Kit for Human Metalloreductase STEAP1
0.312-20 ng/mL 人血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Beta-klotho
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