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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| MS751 (子宮頸表皮癌細胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0385 |
商品介紹：
名稱 MS751 (子宮頸表皮癌細胞) 別稱MS-751; MS 751 種屬人類 年齡（性別）女性，47歲 組織來源宮頸表皮樣癌淋巴結轉移灶 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)上皮細胞樣 背景描述MS751細胞是由J·Sykes于1974年建立的,。有報告稱，MS751細胞含有人乳頭狀瘤病毒18(HPV-18)序列,。后來發(fā)現(xiàn),，MS751細胞包含HPV-45基因組的一部分,，而其中E6/E7區(qū)域表達呈poly(A)+RNA的形式,。 生長培養(yǎng)基MEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~50-60小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, in nude mice; forms poorly differentiated epidermoid carcinoma (grade III). 抗原表達情況Blood Type AB; Rh+ |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
EHD2 基因全長ORF克隆
TROVE2 基因全長ORF克隆
TRAIP 基因全長ORF克隆
GAS7 基因全長ORF克隆
ACAT2 基因全長ORF克隆
FEZ1 基因全長ORF克隆
NDEL1 基因全長ORF克隆
DSTYK 基因全長ORF克隆
GGN 基因全長ORF克隆
XPO1 基因全長ORF克隆
MS751 (子宮頸表皮癌細胞) 氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基（顆粒） 250g
500U Taq DNA聚合 Taq DNA Polymerase -20℃保存
250mL MOPS Buffer,1.0M,pH8.0 MOPS Buffer,1.0M,pH8.0 常溫保存
100uL 玉米泛素基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存
2 ug pMG36e pMG36e 低溫運輸,，-20℃保存
細菌瓊脂粉 Agar Bacteriological 250g
1瓶 SK-BR-3細胞株 SK-BR-3 低溫運輸和保存
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