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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-08 16:35:05瀏覽次數(shù)：284
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0597 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| HPAF-II (胰腺癌細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0597 |
商品介紹：
名稱(chēng) HPAF-II (胰腺癌細(xì)胞) 別稱(chēng)HPAF II; HPAFII; HPAF-2; HPAF2; HPAF/CD18; CD18/HPAF; HPAF-II/CD18; CD-18; CD18; CD 18 種屬人類(lèi) 年齡（性別）男性，44歲 組織來(lái)源胰腺癌 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述HPAF-II is a human pancreatic adenocarcinoma cell line derived from peritoneal ascitic fluid of a 44 year old Caucasian male with primary pancreatic adenocarcinoma and metastases to the liver, diaphragm and lymph nodes.- 生物安全等級(jí)1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基MEM（ATCC改良)＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:3 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~26小時(shí) (PubMed=2734279); 70小時(shí) (PubMed=25984343) 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2，5% 溫度：37℃ |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
DMKN 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MIA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SUMO2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
DBH 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ALDH1B1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CDK5RAP1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CYP20A1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
SEZ6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IGSF8 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ITGA1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
HPAF-II (胰腺癌細(xì)胞) 1%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：1% Dextrose Broth Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.78-50 ng/mL 人NADPH氧化1(NOX-1)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人線粒體轉(zhuǎn)氨(OAT)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL 人C9orf140蛋白(Protein C9orf140)ELISA試劑盒
3.12-200 ng/mL 人纖溶抑制因子(TAFI)ELISA試劑盒
厭氧菌瓊脂 英文名稱(chēng)：Anaerobic Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
大腸桿菌成套生化鑒定管 英文名稱(chēng)： 產(chǎn)品規(guī)格：4種*4套
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Advanced glycosylation end product-specific receptor
0.156-10 ng/mL 豬鏈球菌通用型(SS-U)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
15.6-1000 umol/L 甲型副傷寒沙門(mén)氏菌(SPA)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
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